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生物化工產(chǎn)品products of bioprocesses

時間:2020-03-01 來源:網(wǎng)絡(luò) 瀏覽:
是一大類為數(shù)眾多的由各種生物反應(yīng)過程,即包括發(fā)酵過程、酶反應(yīng)過程或動植物細胞大量培養(yǎng)等過程所獲得的產(chǎn)品。它們的共同特點是以生物來源為主的物料為原料,通過生物催化劑的作用,在生物反應(yīng)器中形成,并通過生化分離工程的有關(guān)手段將其提取純化。這些產(chǎn)品有的也可以用化學合成法生產(chǎn),如乙醇、丙酮、正丁醇、甘油等,究竟采用化學合成法或生物合成法應(yīng)從經(jīng)濟技術(shù)的綜合考慮決定;有些產(chǎn)品則僅能通過生物合成法生產(chǎn)或以生物合成更為經(jīng)濟合理,如青霉素、淀粉酶、維生素B12、干擾素等分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的物質(zhì);有些產(chǎn)品的生產(chǎn)則兼用化學合成和生物合成法,如半合成青霉素、可的松、維生素C等。
  生物化工產(chǎn)品按產(chǎn)品性質(zhì)可分為:①大宗化工產(chǎn)品,如乙醇、丙酮、正丁醇、甘油、檸檬酸、乳酸、葡萄糖酸等;②精細化工產(chǎn)品,如各種氨基酸、酶制劑、核酸產(chǎn)品等;③醫(yī)藥產(chǎn)品,如各種抗生素、多種甾體激素和維生素、常規(guī)菌苗、疫苗等;④其他產(chǎn)品,如生物農(nóng)藥、食用及藥用酵母、飼料蛋白(單細胞蛋白)、沼氣等;⑤現(xiàn)代生物技術(shù)產(chǎn)品,即通過重組DNA技術(shù)和細胞融合技術(shù)等方法生產(chǎn)的產(chǎn)品,如干擾素、單克隆抗體、新型疫苗等。
  丙酮、丁醇  發(fā)酵生產(chǎn)丙酮和正丁醇(簡稱丙-丁或丙酮-丁醇)工業(yè)始于1913年。第一次世界大戰(zhàn)爆發(fā)后,丙酮用于制造炸藥和航空機翼涂料等用量激增。英國首先改造酒精廠為丙-丁工廠,繼而又在世界各地建立分廠,以玉米為原料大規(guī)模生產(chǎn)丙-丁。戰(zhàn)后由于與丙酮同時制得約有二倍量的正丁醇未發(fā)現(xiàn)可利用價值,丙-丁工業(yè)曾衰退停頓,當發(fā)現(xiàn)正丁醇是制造醋酸丁酯作為硝酸纖維素之最佳溶劑后,此工業(yè)又獲得新生。目前,雖然丙酮和正丁醇主要由石油化工方法生產(chǎn),但丙-丁發(fā)酵仍占相當比例。
  丙-丁發(fā)酵是嚴格厭氣發(fā)酵,生產(chǎn)用菌種是丙丁梭菌,以淀粉質(zhì)、糖質(zhì)和纖維質(zhì)為培養(yǎng)基。丙-丁發(fā)酵可用分批或連續(xù)發(fā)酵法進行。大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)大都采用連續(xù)發(fā)酵(圖1)。將合格的丙丁菌種試管斜面接入 61種子瓶,于38±1℃,培養(yǎng)18~22h;然后接入種子罐,于40~41℃培養(yǎng)24h,鏡檢合格后輸入活化罐,于40~41℃培養(yǎng)4h,然后從活化罐上部不斷進入蒸煮醪(經(jīng)滅菌和冷卻后的料液),經(jīng)活化的種子液不斷從活化罐底部流向發(fā)酵罐;若干個發(fā)酵罐相互串聯(lián),發(fā)酵醪流向是下進上出,從進入第一級罐到最后一級罐流出需時 24~36h左右。成熟發(fā)酵醪經(jīng)多塔精餾,分別得到丙酮、正丁醇、乙醇和雜醇油。丙酮、正丁醇、乙醇質(zhì)量比約為3:6:1,每噸總?cè)軇┛傻肅O2、H2等氣體1.7t,其質(zhì)量比氫氣占2.7%,CO2占97.3%,因原料、菌種不同,溶劑比和廢氣比有所變化。

圖1

  檸檬酸  又名枸櫞酸,是一種重要的有機酸,基本上用發(fā)酵法制得。1883年發(fā)現(xiàn)青霉能在含碳水化合物的培養(yǎng)基上積累檸檬酸,從此開始了發(fā)酵法生產(chǎn)的研究。到1923年固體淺盤發(fā)酵檸檬酸投入工業(yè)生產(chǎn);1938年開始液體深層培養(yǎng)的研究,為檸檬酸深層發(fā)酵奠定了基礎(chǔ)。
  檸檬酸發(fā)酵是好氣發(fā)酵。培養(yǎng)基以糖質(zhì)、淀粉質(zhì)和石油(正構(gòu)石蠟烴)等原料,另加入少量無機氮源和微量元素,如(NH4)2SO4、K2HPO4、MgSO4·7H2O等。菌種是黑曲霉和解脂假絲酵母(石油發(fā)酵用菌種)。發(fā)酵過程最適pH2.0~2.5,培養(yǎng)80~100h。發(fā)酵結(jié)束后,發(fā)酵液經(jīng)過濾、脫色、濃縮、結(jié)晶、分離、干燥得檸檬酸成品。檸檬酸主要用于食品工業(yè)作酸味劑,也作油脂的抗氧劑。醫(yī)藥工業(yè)上檸檬酸鐵銨、檸檬酸鈉作為補血劑和輸血劑。化學工業(yè)上檸檬酸酯作為無毒增塑劑,用于制包裝食品用塑料薄膜。還可作為工業(yè)管道的清洗劑和混凝土的緩凝劑等。
  氨基酸  是一類具有一個或多個氨基和一個或多個羧基的有機化合物。將蛋白質(zhì)或多肽用酸水解可得到20種左右重要的氨基酸,這也是較原始的氨基酸生產(chǎn)方法。1957年,日本協(xié)和發(fā)酵公司用谷氨酸棒狀桿菌從葡萄糖發(fā)酵生產(chǎn)L-谷氨酸(用發(fā)酵法生產(chǎn)的氨基酸均為L-氨基酸)?,F(xiàn)在絕大多數(shù)的重要氨基酸都可通過發(fā)酵過程及酶反應(yīng)過程生產(chǎn)。氨基酸主要用于醫(yī)藥、食品添加劑、人造皮革、化妝品等方面。(見彩圖)

氨基酸護發(fā)效果對照  浸前

 

氨基酸護發(fā)效果對照  浸后

  酶制劑  酶是一種生物催化劑。酶制劑是從工業(yè)生產(chǎn)獲得的酶成品(表1)。酶的來源為微生物、動物和植物。由于動、植物生產(chǎn)的酶幾乎均可從微生物制取,而微生物又容易培養(yǎng)、繁殖快、產(chǎn)量高,所以酶制劑的工業(yè)生產(chǎn)主要指工業(yè)上應(yīng)用微生物學方法進行酶的大量生產(chǎn)。

表1

  中國古代的制曲釀酒或作醬,實際上就是一種最早的微生物酶類的生產(chǎn)方式。1949年,日本采用深層培養(yǎng)法生產(chǎn)細菌 α-淀粉酶,微生物酶制劑的生產(chǎn)才進入大規(guī)模工業(yè)化階段。中國生產(chǎn)微生物酶制劑是從1964年開始的,20多年來中國酶制劑工業(yè)發(fā)展很快,目前生產(chǎn)的酶制劑已有30多種。酶制劑的具體生產(chǎn)過程有多種,因微生物種類多,產(chǎn)生的酶系不同而有所差別,這些過程可分成兩大類:液體深層發(fā)酵法和半固體培養(yǎng)法(圖2)。

圖2

目前多采用前者,半固體培養(yǎng)法是傳統(tǒng)的生產(chǎn)淀粉酶和蛋白酶的方法。酶分為胞內(nèi)酶和胞外酶兩種,胞內(nèi)酶須先進行菌體破碎再抽提,胞外酶則可直接從發(fā)酵液中提取。經(jīng)離心或過濾,低溫真空蒸發(fā)濃縮至一定濃度,濃縮液可直接作為商品。經(jīng)濃縮后的濃縮液也可進行沉淀、過濾、干燥后制成酶粉。在實際使用中隨著目的的不同,酶成品的劑型和純度要求也不同,大多數(shù)酶制劑是以自然制取的混合物作為商品,混合物中次要成分在應(yīng)用上也起著重要作用,可加鹽、淀粉等惰性物質(zhì)把酶的含量調(diào)節(jié)到所需濃度。
  疫苗  用細菌、病毒、立克次體和衣原體等病原體制備的生物化工產(chǎn)品。在中國把由細菌制成的疫苗稱作菌苗。用弱化毒性或減毒的活病原體制成的為活疫苗,如牛痘、麻疹疫苗等;用化學或物理方法殺死的病原體制成的是死疫苗,如乙型腦炎、狂犬病疫苗等。
  中國在16世紀(明隆慶年間)即有以輕癥天花病人的痘疹接種于鼻內(nèi)作預(yù)防的方法。到17世紀已相當風行,并先后傳至俄羅斯、朝鮮、日本及歐洲各國。后來E.詹納發(fā)明了牛痘疫苗,即被廣泛用來代替鼻苗。19世紀,L.巴斯德發(fā)明以弱毒菌為菌苗,使疫苗的制備獲得進一步的發(fā)展。菌苗一般均可在嚴格的環(huán)境和設(shè)備條件下,用微生物培養(yǎng)方法進行生產(chǎn),而疫苗的生產(chǎn)必須通過動物或人體細胞的培養(yǎng)才能獲得,技術(shù)復(fù)雜,生產(chǎn)規(guī)模也受到限制。若采用重組DNA技術(shù)獲得的工程菌生產(chǎn)疫苗,則可用類似微生物培養(yǎng)的技術(shù)進行。例如乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)在大腸桿菌、酵母或哺乳動物細胞中得到表達,通過酵母表達來生產(chǎn)的HBsAg,美國已于1986年獲準使用。
  單細胞蛋白  微生物菌體內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì),大多數(shù)用于生產(chǎn)的微生物是從單一的或者絲狀的個體形式生長的,由此得名,簡稱SCP,可用作動物飼料,生產(chǎn)SCP的微生物除了面包酵母、啤酒酵母、產(chǎn)朊圓酵母、熱帶假絲酵母等常被選為生產(chǎn)菌種外,也可用絲狀真菌或細菌。在工業(yè)生產(chǎn)條件下,單細胞蛋白中蛋白質(zhì)的含量約為50%(干基)。常以制糖廠的廢料糖蜜,某些制酒廠、造紙廠的廢液,農(nóng)、林下腳料中可獲得的諸如糖、淀粉和纖維素等有機物作為原料。所以,減少環(huán)境的污染是研究和開發(fā)這類原料生產(chǎn) SCP的一個動力。以甲醇、乙醇等石油化工產(chǎn)品為原料,生產(chǎn)單細胞蛋白在商業(yè)上已引起廣泛的興趣,若干規(guī)模宏大的生產(chǎn)過程已在進行。
  大多數(shù)SCP生產(chǎn)過程是在無菌條件下進行的,成品必須不受其他微生物,尤其是人體病原體的污染。由于設(shè)備投資大,運行動力消耗多,為獲得經(jīng)濟效益,工廠須至少擁有年產(chǎn)萬噸級的規(guī)模,盡量采用連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)提高生產(chǎn)率。同時,要求提供價格低廉,供應(yīng)方便的原料。
  沼氣  形成于沼澤底部的可燃性氣體。主要成分是甲烷占60%~70%(體積),其次為二氧化碳及少量氮氣。其成因是沉積在沼澤底部的植物殘體,在隔絕空氣的情況下,由于嫌氣性微生物(包括甲烷化細菌)的作用腐敗分解所致。其簡單的反應(yīng)過程是(以纖維素為例):
  

  人畜糞便、動植物碎料、污水和垃圾等有機物,在嫌氣細菌和隔絕空氣條件下經(jīng)漚化(發(fā)酵),也能產(chǎn)生沼氣。
  農(nóng)村制造沼氣需要建造不漏氣的發(fā)酵池,并設(shè)有加料、貯氣和清渣裝置。發(fā)酵制氣時須掌握下列條件:①溫度25~35℃;②pH6.8~7.2;③含水量約90%;④常壓并經(jīng)常攪拌;⑤發(fā)酵時間10~20天;⑥適當施加含磷、氮等營養(yǎng)料以助嫌氣細菌的繁殖。
  沼氣熱值約為19.6~29.4MJ/m3,可作煤氣使用;產(chǎn)量大的制氣裝置,氣體經(jīng)凈化脫二氧化碳、硫化氫后可作動力燃料;還可使用沼氣點燈照明。
  沼氣池內(nèi)經(jīng)發(fā)酵后的殘渣,其氮、磷、鉀等相對含量比新鮮物為高,且其中大量的害蟲卵、雜草籽在發(fā)酵過程中被無害化,是很好的農(nóng)肥。
  沼氣與空氣混合,甲烷含量在5%~15%(體積)時形成爆炸性氣體,遇明火即爆炸,故生產(chǎn)、貯運和使用時要防止泄漏,注意安全。
  干擾素  在人體細胞經(jīng)受病毒攻擊誘導后可產(chǎn)生一種對抗病毒的人干擾素,大多數(shù)脊椎動物細胞的干擾素是細胞分泌的一類功能性蛋白質(zhì),它不僅具有抗病毒的活性,還具有參與機體的自然免疫作用。干擾素曾試用于治療多種病毒病和腫瘤,因此引起人們極大的興趣??晒┥a(chǎn)人干擾素的細胞有三種(表2)。目前,生產(chǎn)上大量獲得干擾素有兩個主要途徑;一是通過動物細胞大量培養(yǎng);二是利用重組DNA技術(shù)。1986年8月,美國食物與藥品管理局(FDA)已批準將重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的α-干擾素用于治療多種白血病。

表2

  單克隆抗體  利用免疫動物(指外源抗原物質(zhì)侵入機體后已產(chǎn)生免疫力的動物)的脾臟細胞 (B淋巴細胞,能產(chǎn)生識別、破壞和排斥外來抗原的抗體),與具有酶缺陷的骨髓瘤細胞,經(jīng)細胞融合技術(shù)處理后形成的雜交瘤所產(chǎn)生的一種生物化工產(chǎn)品。
  單克隆抗體由于特異性強,靈敏度高,因此主要用于臨床化學試劑作有關(guān)病毒及微生物等病源體的診斷。若將藥物、毒素或同位素與單克隆抗體相結(jié)合,有可能形成有選擇性殺傷某些病害細胞的治療劑。
  單克隆抗體的生產(chǎn)除了可將雜交瘤接種于小鼠、白兔等腹腔中進行繁殖外,也可采用動物細胞培養(yǎng)設(shè)備進行懸浮培養(yǎng),由于單克隆抗體能從雜交瘤細胞中分泌到培養(yǎng)液中,對產(chǎn)品的提取帶來有利條件,它的精制主要采用層析分離法。
    
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