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酶反應(yīng)過(guò)程enzyme process

時(shí)間:2020-03-01 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò) 瀏覽:
是指利用酶催化劑所具有的特異催化功能,借助工藝學(xué)手段和生物反應(yīng)器裝置來(lái)生產(chǎn)所需的生物化工產(chǎn)品的過(guò)程,與發(fā)酵過(guò)程相比,它采用了反應(yīng)專一性的酶為催化劑,無(wú)副產(chǎn)品,過(guò)程精制和產(chǎn)物分離純化較方便。在生物反應(yīng)器及操作方式上有較大的選擇余地,除分批釜式反應(yīng)外,可考慮用膜式反應(yīng)器進(jìn)行連續(xù)操作。在應(yīng)用固定化酶為催化劑時(shí),更可采用各種固定床和流化床的連續(xù)操作反應(yīng)器。
  沿革  古代人類雖不知道酶的存在,但是自古以來(lái)就知道利用植物和微生物的酶來(lái)催化反應(yīng)生產(chǎn)各種食品。如利用麥芽中的麥芽糖酶來(lái)制備飴糖,利用酒藥中的微生物產(chǎn)生的淀粉酶和酒化酶來(lái)生產(chǎn)酒釀、黃酒和白酒等。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們認(rèn)識(shí)到,雖然酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的,但是許多酶可以單獨(dú)分離得到,在分離的狀態(tài)下,酶仍然能繼續(xù)它的生物催化作用。20世紀(jì)40年代,以生產(chǎn)抗生素為代表的深層液體通氣純種培養(yǎng)技術(shù)獲得成功,從生產(chǎn)技術(shù)方面為酶制劑工業(yè)的形成創(chuàng)造了條件。以后,酶的生產(chǎn)、分離、精制,酶在游離狀態(tài)下的利用,固定化酶的制備和利用,酶反應(yīng)器的應(yīng)用等技術(shù)的發(fā)展,導(dǎo)致70年代初人們將酶反應(yīng)過(guò)程(有時(shí)也稱酶過(guò)程)從發(fā)酵過(guò)程中分出去,單獨(dú)成為酶工程中的核心部分。
  分類  以酶為催化劑的酶反應(yīng)過(guò)程,可根據(jù)作用于底物的酶性質(zhì)決定。以單一酶為催化劑的反應(yīng)稱單酶反應(yīng);以兩個(gè)酶或兩個(gè)以上酶參與反應(yīng)的過(guò)程稱多酶反應(yīng);或稱多酶串聯(lián)反應(yīng)。從化學(xué)反應(yīng)工程角度出發(fā),可分為單(液)相催化反應(yīng)以及多相催化反應(yīng),后者以液固相催化反應(yīng)為主。游離酶的反應(yīng)常屬前者,而固定化酶的反應(yīng)則屬后者。
  組成步驟  以工業(yè)生產(chǎn)為目的的酶過(guò)程可由以下五個(gè)步驟所組成:
 ?、佼a(chǎn)生酶的微生物發(fā)酵過(guò)程。
 ?、诎麅?nèi)酶的微生物細(xì)胞破碎過(guò)程。可用機(jī)械研磨、高壓勻漿器進(jìn)行破碎;也可用加入溶菌酶的方法處理,或用超聲波、反復(fù)凍融的物理方法。胞外酶則不需上述操作,直接將發(fā)酵液過(guò)濾除去菌體即可。
 ?、勖傅姆蛛x純化過(guò)程。根據(jù)酶分子與其他蛋白質(zhì)之間性質(zhì)的差異,例如分子的大小、溶解度的不同,用鹽析法、有機(jī)溶媒沉淀法、電滲析法、離子交換層析和電泳法等技術(shù),將酶進(jìn)行分離純化。
 ?、転榱颂岣呙傅拇呋阅?,將酶固定在載體上的固定化過(guò)程(見(jiàn)固定化酶)。
  ⑤酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì)和酶反應(yīng)控制。對(duì)于游離酶反應(yīng),通常采用分批攪拌槽反應(yīng)器;對(duì)于固定化酶反應(yīng),則常用連續(xù)柱式反應(yīng)器(見(jiàn)生物反應(yīng)器)。
  典型過(guò)程  有單酶反應(yīng)和多酶反應(yīng)。
 ?、賳蚊阜磻?yīng) 用氨基?;笇?duì)?;疍L-氨基酸進(jìn)行水解,析出為L(zhǎng)-氨基酸和?;?D-氨基酸是典型的單酶反應(yīng)?!?

  若采用液相催化反應(yīng),當(dāng)間歇反應(yīng)結(jié)束后,給產(chǎn)物的提取帶來(lái)困難。由于缺乏適當(dāng)分離手段,酶使用一次就被棄掉,很不經(jīng)濟(jì)。目前,工業(yè)上采用液固催化反應(yīng),即用固定化氨基酰化酶進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)(見(jiàn)圖)。底物乙酰-DL-氨基酸溶液以一定流速進(jìn)入酶反應(yīng)柱,反應(yīng)過(guò)程中對(duì)溫度、pH進(jìn)行控制,經(jīng)過(guò)濃縮后,利用溶解度不同進(jìn)行分離得到產(chǎn)品L-氨基酸。?;?D-氨基酸用化學(xué)方法進(jìn)行消旋化反應(yīng)后,作為基質(zhì)循環(huán)使用。該法與用液態(tài)酶間歇式反應(yīng)相比較,有操作穩(wěn)定、分離簡(jiǎn)便、收率高、成本低等優(yōu)點(diǎn)。

圖

 ?、诙嗝阜磻?yīng) 以DL-α-氨基-ε-乙內(nèi)酰胺為原料通過(guò)由L-α-氨基-ε-已內(nèi)酰胺水解和α-氨基-ε-已內(nèi)酰胺消旋酶共同固定的酶柱后,即可獲得最終產(chǎn)品L-氨基酸。  
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