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活細(xì)胞催化劑livingcell catalyst

時(shí)間:2020-03-01 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò) 瀏覽:
一類用于生物反應(yīng)過(guò)程的生物催化劑。目前,工業(yè)上用作活細(xì)胞催化劑的幾乎都是活體微生物細(xì)胞。這些微生物可統(tǒng)稱工業(yè)微生物,包括多種細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌等,由它們所催化的生物反應(yīng)過(guò)程稱發(fā)酵過(guò)程。與由酶催化劑進(jìn)行的簡(jiǎn)單酶反應(yīng)過(guò)程不同,活體微生物細(xì)胞含有多樣維持其生命活動(dòng)和特殊功能的酶系統(tǒng),能適用于多種由若干串聯(lián)反應(yīng)所組成的復(fù)雜反應(yīng)過(guò)程,且無(wú)需另行考慮輔酶再生問(wèn)題。它的另一特點(diǎn)是只需在發(fā)酵開(kāi)始時(shí),往發(fā)酵罐中接入少量菌種培養(yǎng)液或孢子懸浮液,就能在發(fā)酵前期,也即菌體生長(zhǎng)階段形成大量所需的生物催化劑,而不必將菌體所產(chǎn)生的酶提取后再用作生物催化劑。正因其簡(jiǎn)便易得,經(jīng)濟(jì)實(shí)用而被廣泛采用,但其缺點(diǎn)是反應(yīng)途徑較難控制,發(fā)酵終了時(shí),副產(chǎn)物及菌體自溶物較多,給產(chǎn)品分離帶來(lái)困難。
  來(lái)源  微生物由于其種類繁多,作用各異,在自然界分布極廣,在土壤、水域、腐敗物以及其他生物體內(nèi)廣泛存在。微生物個(gè)體雖小,但它是一個(gè)能在特殊條件下生活及具有某些特性的獨(dú)立的生命體,有完整的酶系統(tǒng),代謝能力和繁殖能力都很強(qiáng),對(duì)環(huán)境有很大的適應(yīng)性,對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求一般不高,因此通過(guò)人工大量培養(yǎng),遠(yuǎn)較從動(dòng)植物細(xì)胞易于獲得。微生物還有易于改變遺傳性能,包括改變其對(duì)環(huán)境適應(yīng)性,代謝途徑等性能的特點(diǎn),且可利用重組DNA技術(shù)及細(xì)胞融合技術(shù)對(duì)生產(chǎn)菌種作更深入的改造,因此是一種理想的活細(xì)胞催化劑。
  要從自然環(huán)境中將需要的微生物分離出來(lái),并使之能成為生產(chǎn)菌種,是十分艱苦復(fù)雜的工作。首先要從土壤、腐敗物等各種微生物群集的采樣中進(jìn)行純種分離,獲得各種單一的微生物菌落(即單一微生物在固體培養(yǎng)基表面上形成的集落)。然后,用事先設(shè)計(jì)好的篩選方法,把所需要的具有特殊性能的微生物篩選出來(lái)。初步獲得的菌種還需要經(jīng)過(guò)一系列的性能測(cè)定和分類鑒別工作。為了提高其生產(chǎn)能力和進(jìn)行性能改造,還需要進(jìn)行遺傳學(xué)方面的工作,使之成為有生產(chǎn)價(jià)值的菌種。
  主要工業(yè)微生物  主要工業(yè)微生物及其形態(tài)和特性為:
  細(xì)菌  種類繁多,形態(tài)各異,分布廣,約占微生物總數(shù)之半?;拘螒B(tài)呈球狀、桿狀或螺旋狀(圖1)。球菌直徑約0.5~1.0μm;桿菌直徑約0.4~2.0μm;長(zhǎng)度約0.8~6μm。具有細(xì)胞壁和膜、擬核和核糖體等結(jié)構(gòu),但無(wú)細(xì)胞核膜,屬原核細(xì)胞。有的細(xì)菌還有鞭毛及莢膜,以二分裂繁殖為主。芽孢桿菌及梭桿菌等在不良環(huán)境下會(huì)產(chǎn)生芽孢,芽孢在適宜環(huán)境下又能形成菌體。

圖1 細(xì)菌

  放線菌  介于細(xì)菌和真菌之間的單細(xì)胞原核生物,故分類上屬于細(xì)菌。菌體形態(tài)大多為絲狀(圖2),菌絲無(wú)隔膜,粗約1μm。放線菌中的鏈霉菌的繁殖是通過(guò)菌絲頂端形成分生孢子實(shí)現(xiàn)的。

圖2 放線菌

  酵母菌  真菌中的一類,菌體多呈球、卵或臘腸狀,一般直徑為1~5μm,長(zhǎng)為5~30μm,也有少數(shù)酵母菌是長(zhǎng)有假菌絲的(圖3)。酵母具有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu),具有細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、染色體、細(xì)胞器等,屬真核細(xì)胞。通常以出芽繁殖為主,也可以進(jìn)行裂殖,有時(shí)還可進(jìn)行有性繁殖,產(chǎn)生子囊孢子。

圖3 酵母菌 a 各種典型的酵母形態(tài) b 帶有隔膜的假菌絲

  霉菌  真菌中各種絲狀菌的總稱(圖4),均屬真核細(xì)胞。菌體由分枝或不分枝的菌絲交織而成,有的為無(wú)隔膜的多核單細(xì)胞體,而更多的為有隔膜的單核或多核的多細(xì)胞體。菌絲一般直徑為3~10μm,繁殖方法很多,除了菌絲片段可生長(zhǎng)為新菌體外,無(wú)性繁殖時(shí)一般形成孢囊孢子或分生孢子,有性繁殖則發(fā)生在特殊條件下,通過(guò)有性孢子的形成而實(shí)現(xiàn)。

圖4 霉菌

  產(chǎn)品和所用微生物  同一產(chǎn)品可用不同微生物進(jìn)行生產(chǎn);有時(shí)一種微生物在不同條件下能產(chǎn)生不同的產(chǎn)物。為此,根據(jù)不同情況合理選擇菌種(見(jiàn)表)是十分重要的。

圖

  發(fā)展趨勢(shì)  活細(xì)胞也可以進(jìn)行固定化后用作生物催化劑,稱為固定化細(xì)胞。它仍能保持活細(xì)胞的性質(zhì),但又如固定化酶那樣,可以在一定時(shí)間內(nèi)反復(fù)使用和實(shí)現(xiàn)連續(xù)化操作。活細(xì)胞固定化的方法與酶固定化類似,但以包埋法為主,也有用物理吸附法的。有的微生物本身能結(jié)團(tuán)或凝集,則可不必另行固定化。目前,用固定化細(xì)胞生產(chǎn)6-氨基青霉烷酸和酒精的過(guò)程已經(jīng)工業(yè)化,用于生產(chǎn)啤酒等產(chǎn)品的過(guò)程也趨于成熟。這是一種有發(fā)展前途的生物催化劑,各國(guó)對(duì)此的研究相當(dāng)活躍。要解決的技術(shù)問(wèn)題主要是它的活力維持、固定化顆粒的機(jī)械強(qiáng)度、傳遞性能和防止污染等問(wèn)題。  
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