本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜、禽肉中氯霉素的測定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于畜、禽肉中氯霉素的檢驗。？[第1頁] ICS 67. 120X 04* $ : 14167-2004 中華人民共和國國內(nèi)貿(mào)易行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) SB/T 10386-2004 畜 禽 肉 中 氯 霉 素 的 測 定 Determination of chloramphenicol in meat of livestock and poultry 2004-08-04發(fā) 布 2004-09-01實 施 中華人民共和國商務(wù)部發(fā)布 [第2頁] SB/T 10386-2004 　　　　　　　　　　　　　　一 　 前 　 　 　 　 　 目 　　本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國商務(wù)部提出． 　　本標(biāo)準(zhǔn)由商務(wù)部屠宰技術(shù)鑒定中心負(fù)責(zé)起草 ， 中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所 、 河北省疾 病預(yù)防控制中心參加起草 。 　 　 本 標(biāo) 準(zhǔn) 主 要 起 草 人 。 劉 文 娟 、 楊 祖 英 、 宋 書 鋒 、 韓 會 新 、 張 新 玲 、 劉 虎 成 、 王 貴 際 ． 　　本標(biāo)準(zhǔn)委托商務(wù)部屠宰技術(shù)鑒定中心負(fù)賁解釋 。 [第3頁] SB/T 10386-2004 畜 禽 肉 中 氯 霉 素 的 測 定 范 圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了畜 、 禽肉中氯霉素的測定方法． 本標(biāo)準(zhǔn)適用于畜 、 禽肉中氯霉素的檢驗． 2原 理 　　試樣中殘留的El,霉素經(jīng)乙酸乙M 提取后．經(jīng)減壓濃縮 ， 用0. 5 mol/L高x酸溶解殘渣 ， 用正己烷去 除脂肪 ， 經(jīng)微孔濾膜過濾后 ， 濾液供高效液相色譜分析 。 3試劑和材料 　　以下所用的試劑．除特別注明者外均為分析純試劑．水為重蒸水． 3. 1甲a｛色譜純。 3.2正己烷． 3.3 #t霉素每毫克相當(dāng)994單位 ， 含量>99%. 3.4乙酸乙Na. 3.5高A酸． 3.6 k霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精確稱取0. 010 g Ik霉素標(biāo)準(zhǔn)品 ， 置于100 MI.容量瓶中 ， 加甲醇溶解并稀釋 至刻度 ， 搖勻 。 此溶液濃度為0. 10 mg/mL ， 置于冰箱中保存 ， 有效期3個月 。 3.7 A霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液：梢確吸取5.0 mL儲備液于50 mL容量瓶中 ， 用甲醇稀釋至刻度．此溶液濃 度10 μ g/mL ， 置于冰箱保存 。 有效期半個月 。 臨用前取此液用0. 5 mol/L高a酸稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo) 準(zhǔn)工作液． 4儀器和設(shè)備 4. 1高效液相色譜儀 （ 配紫外檢測器 ） 。 4.2旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。 4.3渦流混勻器。 4．4超聲波發(fā)生器 。 4.5旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。 4.6微孔a膜過it. 5測定步驟 5.1提取 　　取200 g試樣絞碎 ， 稱取20 g （ 精確至0. 01 g ） 絞碎后的試樣 ， 置于100 mL具塞三角瓶中 ， 加人 40 mL乙酸乙酯 ， 振搖 ， 超聲提取30 min ， 過濾Id液放于另一三角瓶中．再加入20 mL乙酸乙PH于試 樣 中 ， 超 聲 提 取15 min ， 過 濾 ， 濾 液 合 并 ， 濾 渣 再 加20 mL乙 酸 乙 酯 超 聲 提 取15 min ， 過 濾 ， 濾 液 合 并 ， 全 部濾液合并轉(zhuǎn)入濃縮瓶中． 5.2凈化 　　將合并的a液于5210-55℃水浴旋轉(zhuǎn)A發(fā)儀上濃縮至干 。 準(zhǔn)確加入1. 0 MIA. 5 mol/L高x酸溶 液洗滌濃縮瓶中殘留物 ， 再加入1 mL正己烷 ， 振搖I min ， 將全部溶液轉(zhuǎn)移至5 mL試管中 ， 靜止分層 ， 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 1 [第4頁] SB/T 10386-2004 吸棄正己烷層 ， 再加入2 mL正己烷提取脂肪 ， 再吸棄正己烷層 ， 高氯酸溶液過0.45μ mtt膜 ， 濾液供高 效液相色譜測定 。 5.3測定 5.3. 1液相色it參考條件 　　a ） 色譜柱：Hypersil ODS2 250 mmX4.6 mm,粒徑5 μ m; 　　b ） 流動相：甲a十水＝45十55; 　　c ） 流速：1. 0 ml./min; 　　d ） 檢測波長：280 nm; 　　e ） 柱溫：室溫 ！ 　　f） 進樣量：20 μ L. 5.3.2氯耳紊標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 　　依照上述色譜條件 ， 分別注入標(biāo)準(zhǔn)工作液各點．每個標(biāo)準(zhǔn)液進20 μ L測定其峰面積 ， 然后以標(biāo)準(zhǔn)液 濃度對峰面積作校準(zhǔn)曲線 ， 求出回歸方程及相關(guān)系數(shù) 。 5.3.3樣品的測定 　　在上述色譜條件下 ， 吸取已凈化的樣品溶液20 μ L ， 進行HPLC分析 。 6結(jié) 果 6.1計算 　　將標(biāo)準(zhǔn)曲線各點的濃度與對應(yīng)的峰面積進行回歸分析 ， 然后按式 （ I） 分別計算供試樣中氯霉素的 含量 。 cXVX ． 1 000 ............................................. (1 ) 　 m x 1 000 　　式中： 　　X-—樣品中氯霉素的含量 ， 單位為毫克每千克 （ mg/kg) ; 　 　c“一 一 被 測 液 中IK霉 素 的 含 量 ， 單 位 為 微 克 每 毫 升 （ μ g/mL); 　 　V一 一 被 測 液 體 積 ， 單 位 為 毫 升 （ mL); 　 　m — — 樣 品 質(zhì) 量 ， 單 位 為 克 （ g). 6.2檢出限 　　本方法的檢測限為0.01 μ g/mi.， 當(dāng)取樣量為20 g時 ， 最低檢測量為1.0 μ g/kg. 7允許差 同一分析者同時或相繼兩次測定結(jié)果之差不得超過均值的1500. [第5頁] 對   閃 l   的  一 趕 曲 的 　 　 　 中 華 人 民 共 和 國 國 內(nèi) 貿(mào) 易 　 　 　 　 行 業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn) 畜 禽 肉 中 氯 霉 素 的 測 定 　　　　　SB/T 10386-2004 　中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行 　北京復(fù)興門外三里河北街16號 　 　 　 　A6政 編 碼,100045 　　網(wǎng)址www.bzcbs.com 　 　 電 話 ： 68523946 68517548 中國標(biāo)準(zhǔn)出版杜秦皇島印刷廠印刷 　 　 　 　 各 地 新 華 書 店 經(jīng) 銷 開 本 880X 1230 1/16印 張 0.5字 數(shù) 5千 字 2004年 10月 第 一 版 2004年 10月 第 一 次 印 刷 書號’155066 ？ 2-15962定價8.00元 1I1 I IIIIIIgIIIIhInIIVIIOB11SB 1 /T 0 386-2004