耐熱果膠裂解酶基因pel9A的克隆和表達(dá)

期刊名字：食品與生物技術(shù)學(xué)報
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論文作者：甄東曉，王樹英，嚴(yán)群，李華鐘
作者單位：江南大學(xué)
更新時間：2023-03-23
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論文簡介

利用PCR技術(shù)從耐熱梭狀芽孢桿菌(Clostridium stercorarium)中擴增得到產(chǎn)耐熱果膠裂解酶的結(jié)構(gòu)基因pel9A,并將其克隆于表達(dá)載體pET28a中,最后將此重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體菌E.coli BL-21中進行表達(dá).誘導(dǎo)條件為:37 ℃誘導(dǎo)5 h,IPTG濃度為0.8 mmol/L.重組菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)和SDS-PAGE分析表達(dá)的蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量為130 000,與預(yù)期相對分子質(zhì)量相符.細(xì)胞經(jīng)超聲破碎后,測得果膠酶的比酶活為15 U/mg粗蛋白.

論文截圖

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