醫(yī)學信息2010年11月第23卷第11期Medical Information.Nov 2010. Vol. 23. No.11臨床醫(yī)學糞便軟化排出,或用肥皂水灌腸或肛門]內使用開塞露促使排便。心表1本組患者死亡率及護理滿意度評價統(tǒng)計動過緩病人避免排便時過度屏氣，以免興奮迷走神經加重心動過疾病診斷患者人數死亡人數死亡率 護理滿意度緩。生活不能自理的老年患者的飲食、大小便、洗漱等均由護士協(xié)助急性心肌梗死8非常滿意完成。囑患者戒姻限酒,減少心血管病事件發(fā)生的誘因。并且要注意冠心病50口腔黏膜及皮膚的變化,及時進行預防、護理。皮膚護理方面,應保心絞痛_5持床鋪干沽,平整、無皺折,受壓處給予勤翻身、局部按摩等。對于手術病人還應注意禁食時間。4討論2.4病情觀察護理心血管疾病常由某些因索誘發(fā)而加重,因此應加由于護理對象是老年心血管疾病的患者，心血管疾病屬于危險強對患者的觀察護理。首先應嚴密關注患者的體溫、心率.血壓.血病癥,死亡率較高,這就要求護士要具備思維敏捷知識豐富、語言恰糖等生命體征變化,根據患者的全身情況制訂基礎護理的方案。同當及技術嫻熟等良好的素質和高尚的職業(yè)道德。從患者的角度出發(fā),時，及時了解患者不適主訴,如胸悶、胸痛、氣短.并觀察其部位,性讓其感受到家- -樣溫 馨的住院環(huán)境.醫(yī)護人員的細心體貼,做好每一質及持續(xù)時間，及時通知醫(yī)生并采取措施。其次.要認真觀察病情變位患:者的心理護理、生活護理和疾病的觀察護理。只有通過精心、耐化,掌握?？瞥Ｓ盟幍淖饔谩⒆⒁馐马?。心血管疾病藥物對老年患者心的護理,才能為患者減輕病痛,提高治愈率,同時可以縮短住院日,與中年患者在劑量上有很多不同，因此,應根據老年人的排泄能力減少并發(fā)癥,促進患者早日康復。差,腎功能減退的特點,嚴格學握劑量密切觀察其精神狀態(tài)、血壓、參考文獻:尿量及胃腸道反應,做好三查七對,加強巡視,輸液時控制滴速,提[周麗霞等，對老年人心血管疾病的護理體會田中外健康文摘,2009,8.高靜脈穿刺成功率,保護好患者血管。(27):185-186.3結果[2]沈宏云,心血管疾病的個性化護理D.醫(yī)學信息,2010,23(2):206-207.本組198例患者，經過治療護理后,除2例由于搶救無效死亡[3]王茵,心血管疾病患者的心理特點、生活質量及護理對策[J.中國實用護理外,其余患者的病情均恢復穩(wěn)定出院.護理治療的有效率為98.98%。雜志，2009, 25(9):85-86.編輯/雅蘭本組患者死亡率及護理滿意度評價統(tǒng)計如表1:常規(guī)PCR技術與單分子PCR技術劉連生(長江大學醫(yī)學院，湖北荊州434023)摘要:常規(guī)PCR技術大都以大量DNA分子(一般為10個以上)為模板進行DNA擴增。單分子PCR技術是以極少量DNA分子(1、5或10個分子)為模板進行DNA擴增。在高保真度DNA聚合酶作用下,單分子PCR技術能擴增出高度一致的DNA;在低保真度DNA聚合酶作用下。單分子技術又能構建出大量突變基因的DNA文庫。關鍵詞:常規(guī)PCR;單分子PCR;DNA聚合酶PCR (polymerase chain reaction )的中文全稱為聚合鏈反應。SM-PCR是基于常規(guī)PCR技術發(fā)展而來的,包括變性、退火、延PCR技術隨著自身的發(fā)展及其與已有分子生物學技術的結合衍生伸3個基本環(huán)節(jié),但在模板數量、引物設計.DNA聚合酶選擇以及反了多種技術,如逆轉錄PCR( reverse tasription PCR, PT-PCR ).原應條件上與常規(guī)PCR存在較大區(qū)別。為PCR(in situ PCR )實時PCR(in situ PCR )等川。單分子PCR模板的準備:SM--PCR是在DNA模板稀釋到極端條件下進行(single moleular PCR, SM-PCR )技術是最近發(fā)展出的新的PCR的擴 增反應.模板的質量直接決定實驗的成敗與擴增效率。實驗中,技術。該文將著重介紹常規(guī)PCR技術與單分子PCR技術要點、特點首先用限制性內切酶消化質粒DNA得到含有靶DNA的片段，經常及其優(yōu)點。規(guī)PCR擴增,PCR產物再經酚/氯仿抽提,酒精沉淀和HPLC等方式1常規(guī)PCR技術要點叫純化。純化的DNA用含0.1%(V/W)的藍色葡聚糖2000或1ng/LPCR反應體系的基本成分包括:模板DNA、特異性引物、耐熱t(yī)RNA的TE溶液“稀釋到1個(或5個,或10個)分子/μl的終濃度。DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)、dNTP以及含Mg*的緩沖液。藍色葡聚糖2000或Ing/LtRNA的作用是為了防止DNA吸附于管模板DNA的變性模板DNA經加熱至94c,使模板DNA雙鏈壁上,以保證模板DNA的正常變性.引物的退火以及鏈的延伸。完全變性或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈.同時引物的設計: SM-PCR 反應混合物中模板數極低，若引物之間引物自身以及引物之間的局部雙鏈也得以打開。存在少量配對序列,循環(huán)擴增下極易形成二聚體。因此。在進行引物模板DNA與引物的退火模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫設計時應嚴格控制其GC含量和Tm值,同時盡量避免引物間存在可度降至559C,引|物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合。配對序列。實驗證明，引物工作濃度在3μmo/L時,可以得到理想的引物的延伸將溫度升至729C,DNA模板一引物結合物在PCR產物;高于或低于3μmo/L, PCR產物的數量都不理想!。TaqDNA聚合酶的作用下發(fā)揮酶活性，以dNTP為底物催化DNA的DNA聚合酶的選擇SM- -PCR反應中模板數很少，循環(huán)數多，合成反應。上述三個步驟構成- - 個循環(huán),新合成的DNA分子繼續(xù)作dNTP損耗很為下一輪合成的模板,經多次循環(huán)(25-30次)后即可達到擴增DNA大,因此選擇何種:中國煤化工需要產生突變。片段的目的。在體外定向進化中YHCN M HG變基因文庫,因2 SM- -PCR技術要點此,選擇低保真度TrspunA果口孵,共用大多八平小10/bp,擴增效率為70%時,將200bp長的片段擴增- -百萬倍,產物錯誤率達33%收稿日期:2010-09-21臨床醫(yī)學醫(yī)學信息2010年11月第23卷第11期Medical Information.Nov. 2010. Vol. 23. No.11間。在基因組測序及法醫(yī)鑒定中，為獲得大量無突變,高度- -致的下連續(xù)反應，顯著提高了PCR反應產物的特異性。PCR擴增的特異PCR產物.通常選用高保真度pfuDNA聚合酶，其錯誤參入率為7x性還依賴于兩個引物設計的好壞，依賴于引物與模板結合的準確性。10-7hbp, 在同樣實驗效率下將500bp 長的片段擴增- -百萬倍,產物3.3操作簡便、快速整個PCR操作過程,從標本處理、PCR擴增到錯誤率為0.7%m。產物分析?？稍?h內完成全部實驗。擴增產物可直接供作序列分析反應條件SM-PCR 的變性溫度(96- 98C)大多比常規(guī)PCR和分子克隆,擺脫繁瑣的基因分析方法,可直接從總RNA或DNA中(94C)高,其變性時間(5~ 15s )短于常規(guī)PCR(40),同時退火時間及或部分DNA已降解的樣品中分離目的基因,省去須先進行克隆后再延伸時間也相應縮短;常規(guī)PCR循環(huán)為3~5h,因此必須選擇熱穩(wěn)定作序列分析的模式。性好的DNA聚合酶。4 SM-PCR技術優(yōu)點0預防污染SM-PCR 中模板數量極少,少量污染都會導致實驗SM-PCR指的是以少量或單個DNA分子為模板進行的PCR。產生錯誤,甚至整個實驗失敗。在處理樣品的過程中,微量移液器，4.1極少的模板數,通常為1.5或者10個DNA分子。空氣等極易造成樣品間的交叉污染。此外.試劑配制中也極易被污4.2更微型化的體系,SM-PCR體系大多在10ul 左右。染而導致SM-PCR污染。因此,實驗中應注意設陰性對照。4.3可構建出大小可控的文庫，不同模板數構建的文庫大小是不同3 PCR技術特點叫的，如DNA模板數位10個分子時,文庫大小是模板數為1個分子的3.1敏感性高PCR產物的生成以指數方式增加，能將極微量的靶10倍DNA成百萬倍以上地擴增到足夠檢測分析量的DNA。這是PCR技參考文獻:術最主要的特點,它可對單拷貝基因、單個細胞、單根頭發(fā)、- -滴血[1]查錫良.生物化學[M]第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 209:4838 485.等微量標本進行分析。[2] 張杰道生物化學實驗技術PCR技術及應用[M].科學出版社,2005:12-18.3.2特異性強自從提取出耐熱TaqDNA聚合酶以來，在熱變性處理[3] Yamane T, et al .Nippon Nofeik Kaishi , 2004,78(8):751-753.時不被消化,不必在每次循環(huán)擴增中再加人新酶，以及在較高溫度[4]王國華,等生物化學與生物物理進展, 20.31(2);1592- 161.編輯/杜蘇利鼓室沖洗注藥治療分泌性中耳炎療效分析劉仁輝(四川省廣元市劍閣縣人民醫(yī)院耳鼻喉科,四川廣元628300)摘要:目的探討分析鼓室沖洗注藥治療分泌性中耳炎(SOM)的臨床療效。方法將臨床診斷為分泌性中耳炎的 223例患者隨機分為鼓室沖洗注藥組及常規(guī)治療組進行臨床對照研究。結果鼓室沖洗注藥組和常規(guī)治療組兩組總有效率分別為91.3%和65.2%,鼓室沖洗注藥組的總有效率明顯高于常規(guī)治療組(P<0.01)。鼓室沖洗注藥組除耳內短時間悶脹外,均未出現劇烈疼痛、鼓膜損傷、大出血和咽鼓管損傷等術中并發(fā)癥。常規(guī)治療組3例出現粘連性中耳炎,鼓室硬化。術后隨訪,兩組均未發(fā)現有咽鼓管狹窄等術后并發(fā)癥。結論鼓室沖洗注藥法治療分泌性中耳炎可明顯提高療效,具有操作簡單,療效可靠,更易于病人接受。關鍵詞:鼓室沖洗注藥法;分泌性中耳炎;常規(guī)鼓膜穿刺;療效分析本文對我院自2006年08月~2009年10月223例慢性分泌性出棉片,以6號細長針頭于鼓膜緊張部前下方或后下方刺人中耳腔，中耳炎患者進行鼓室沖洗注藥治療,取得了理想的療效,現報告如輕輕回抽至吸出氣泡液體。鼓室注藥治療組:同上消毒麻醉,抽取地塞米松Iml ,a-糜蛋白1資料與方法酶5mg,6號細長針頭行鼓膜穿刺,將藥液緩慢注人鼓室,注藥后囑患1.1 - -般資料慢性分泌性中耳炎患者 223例，其中單側中耳炎患者頭偏向另一側,按壓耳屏3~5次，患者可感到咽腔發(fā)苦或有藥液者188例,雙側中耳炎患者35例,共計258耳。男172例(單側157流出,此后回抽鼓室內沖洗液,患者即刻可感到耳悶、脹感明顯減例,雙側15例),女51例(單側31例,雙側20例),年齡10-69歲,平輕。治療完畢,清除外耳多余藥液。1 次/周,2-4次為1療程。療程完均33歲。病程4d-11ao成后1周復查。兩組治療期間予以抗炎.抗組胺、稀化粘素.1%麻黃隨機將其分為兩組,鼓室沖洗注藥組和常規(guī)治療組,其中鼓室沖素滴鼻、抗生素.激素及配合鼓膜按摩,捏鼻鼓氣等治療。均囑患者洗注藥組109例(單側92例,雙側17例,共計126耳),男82例,女復診,1周未痊愈者再次同法治療,治療結束后復查純音測聽和聲導27例,年齡11-68歲,平均年齡32歲;常規(guī)治療組114例(單側96抗,療效判定標準參考文獻標準。例,雙側18例.共計132耳),男90例,女24例,年齡10-69歲,平1.3統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0軟件做統(tǒng)計學分析.率的比較采用卡均年齡33歲。均有不同程度的上呼吸道感染史,鼻塞,耳鳴聽力下方檢驗，P<0.05 ,表明兩組間比較差異有統(tǒng)計學意義。降,耳內脹滿感,伴(或不伴)耳鳴。兩組病例在年齡、性別、病癥上差2結果別無顯著性(P>0.05)。2.1兩組患者治療療效的比較兩組總有效率 分別為91.3%和1.2方法常規(guī)治療組:采取常規(guī)鼓膜穿刺治療?；颊呷∽?75%酒65.2%，經統(tǒng)計學x檢驗，具有統(tǒng)計學差異，且有顯著性意義(P<精消毒外耳道皮膚,2%丁卡因棉片貼敷鼓膜表面麻醉,10min后取0.01),具體見表1。表1兩組患者治療療效的比較組別耳數治愈(%)顯效(%)有效中國煤化工總有效率(%)常規(guī)治療組13260(45.5)10(7.6)16(12MYHCNMHG126(6.2)鼓室沖洗注藥組26102(81.0) _10(7.9)3(2.4)_ 11(8.7).115(91.3)收稿日期:2010- 09-214380 !