第29卷,第3期光譜實(shí)驗(yàn)室Vol 29, No. 3012年5月Chinese Journal of spectroscopy LaboratoryMay,2012白芷的提取工藝0索建蘭②袁佳妹(寶雞文理學(xué)院化學(xué)化工系陜西省寶雞市高新大道1號(hào)721013)摘要探討多因素實(shí)驗(yàn)條件對(duì)白芷的提取工藝參數(shù)的影響以歐前胡素和異歐前胡素的含量為指標(biāo),以乙醇濃度、乙醇用量、提取時(shí)間提取次數(shù)為因素進(jìn)行單因素試驗(yàn)。結(jié)果表明白芷的最佳提取工藝參數(shù)為:以8倍量80%乙醇提取3次,每次lh關(guān)鍵詞白芷;歐前胡素;異歐前胡素;高效液相色譜;乙醇回流提取;浸泡提取中圖分類號(hào):0657.7+2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1004-8138(2012)03-1620-031引言白芷( Radiz angelicae Dahuricae)為傘形科當(dāng)歸屬植物白芷[ Angelica dahurica( Fisch.exHoffm.) Benth. et Hook.f.]或杭白芷[ Angelicadahurica( Fisch. ex Hoffm.) Benth. et Hook.f.var.formosana(Bois. Shan et Yuan]的干燥根,別名芷,芳香,分布浙江、臺(tái)灣等地。喜溫暖濕潤(rùn)的氣候和陽(yáng)光充足的環(huán)境條件,怕高溫、能耐寒、適應(yīng)性強(qiáng)。白芷對(duì)光照長(zhǎng)短、強(qiáng)弱雖不甚敏感,但光能促進(jìn)其種子發(fā)芽白芷中含有揮發(fā)油及多種香豆素類衍生物。其中香豆素類成分主要如白歐前胡素、氧化前胡素異歐前胡素等的含量約為0.221%-1.221%如白當(dāng)歸素(白芷素),白當(dāng)歸醚(白當(dāng)歸腦、白芷醚)、歐前胡素、異歐前胡素、氧化前胡素、珊瑚菜素、花椒毒素、新白芷醚和去甲基蘇北羅新等具有良好的止痛作用,醫(yī)生在止痛中使用白芷的頻率極高。九味羌活湯、柴葛解肌湯等名方中的白芷所發(fā)揮的效用之一就是止頭痛。白芷與馬錢子等制成的筋骨活絡(luò)丸是治療風(fēng)濕痛、關(guān)節(jié)炎的中國(guó)專利產(chǎn)品。白芷能減少黑色素的形成,又可以潤(rùn)澤肌膚,同時(shí)還有消毒的作用2等現(xiàn)在已有不少國(guó)家開(kāi)始重視白芷在美容產(chǎn)品中的應(yīng)用。因此充分利用白芷為我國(guó)傳統(tǒng)中藥和發(fā)揮白芷主產(chǎn)區(qū)的優(yōu)勢(shì),將中醫(yī)藥理論,結(jié)合現(xiàn)代技術(shù)與市場(chǎng)需求,對(duì)白芷的美容成分進(jìn)行研究提取有效美容成分,開(kāi)發(fā)針對(duì)美白、祛斑、潔牙等方面的功能性化妝品或護(hù)膚品是綜合開(kāi)發(fā)白芷產(chǎn)品的一個(gè)重要方向2實(shí)驗(yàn)部分2.1材料與儀器白芷(秦嶺太白山);柱層析硅膠(200-300目);歐前胡素對(duì)照品(98%批號(hào):110826-200712,北京中國(guó)藥品生物制品檢定所)、異歐前胡素對(duì)照品(98%批號(hào):110827-200407,北京中國(guó)藥品生①陜西省植物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重點(diǎn)項(xiàng)目(20101S067)陜西省教育廳項(xiàng)H中國(guó)煤化工CNMHG②聯(lián)系人,手機(jī):(0)13991766353E-mal:suon@yahoo,com.cn作者簡(jiǎn)介;索建蘭(1965-),女,陜西省寶雞市人,教授,主要從事中藥研究工作收稿日期:2011-08-16;按受日期:2011-09-19第3期索建蘭等:白芷的提取工藝1621物制品檢定所)。SHB-■型循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司);R-1002型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司);KQ5200E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);D101型大孔樹(shù)脂柱(杭州三特醫(yī)藥化工設(shè)備有限公司)。乙醇(分析純);乙酸乙酯(分析純)。實(shí)驗(yàn)用水為去離子水。2.2實(shí)驗(yàn)方法2.2.1乙醇浸泡提取白芷室溫干燥后用藥物粉碎機(jī)粉碎得白芷粗粉,將粉碎好的白芷粗粉置于100mL·燒杯中,用乙醇(8:1mg/g)浸泡24h,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將其濃縮回收乙醇,得到白芷提取物;同法浸泡提取3次第2次浸泡需12h,第3次浸泡需6h。2.2.2乙醇回流提取將粉碎好的白芷粗粉置于1000mL三頸燒瓶中,并加入等質(zhì)量乙醇以及幾粒沸石,安裝好回流裝置,插人溫度計(jì)控制溫度在50C左右。按照單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)提取次數(shù)以及提取時(shí)間。將每次的回流提取液收集,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將其濃縮,得濃縮物即為白芷粗提物。蒸出的乙醇回收。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取,剩余部分為水。將水部分上樣于D101大孔樹(shù)脂柱,水-乙醇(1:v/)梯度洗脫,分為6個(gè)部分,將50%洗脫部分分別進(jìn)行硅膠柱層析,再用氯仿甲醇(體積比10:1—7:3)梯度洗脫,各流分采用薄層色譜或高效液相色譜檢出,合并相類似組分,反相柱層析反復(fù)分離,凝膠純化,得到6個(gè)化合物。2.2.3分離將用上述方法得到的待分離樣品及此處所選的沉淀部分用適量乙酸乙酯溶解,加入適量硅膠質(zhì)量比按1:1混合),置于研缽中于紅外燈下加熱研磨,直至溶劑揮發(fā)混合物變?yōu)榉勰?使樣品均勻吸附于硅膠上,備用。選一根大小合適的玻璃色譜柱,柱下端用少量棉花或脫脂棉堵住,然后將薄層層析硅膠(200-300目,硅膠量是樣品量的3040倍)加入色譜柱中,并于柱底出口處抽真空使柱子填裝密實(shí)裝平,并成適當(dāng)高度。然后再將制好的待分離樣品加入柱中進(jìn)行分離。3結(jié)果與討論3.1單因素試驗(yàn)3.1.1不同乙醇濃度對(duì)總香豆素含量的影響在白芷提取過(guò)程中,由于歐前胡素、異歐前胡素在乙醇中有較好的溶解性,因此選擇乙醇為提取溶劑,并分別選擇不同濃度的乙醇、乙醇用量提取時(shí)間提取次數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)。在預(yù)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),其他提取條件相同,白芷用不同濃度的乙醇提取,歐前胡素、異歐前胡素含量差別較大,結(jié)果見(jiàn)表1。表1不悶濃度乙醇提取歐前胡素異歐前胡素的含量結(jié)果乙醇濃度(%)中國(guó)煤化工CNMHG歐前胡素(mg/g)異歐前胡素(mg/g)0.360.390.420.470.38由表1可見(jiàn),乙醇濃度在80%時(shí)提取效果最佳。1622光譜實(shí)驗(yàn)室第29卷3.1.2不同乙醇用量對(duì)總香豆素含量的影響將提取次數(shù)固定為3次,乙醇濃度固定為80%提取時(shí)間固定為1h,分別以4、6、8、12倍乙醇mL)于白芷(g)的溶媒量進(jìn)行提取考查不同乙醇用量對(duì)總香豆素含量的影響,結(jié)果見(jiàn)表22不同乙醇用量對(duì)總香豆素含量的影響乙醇用量(倍)歐前胡素(mg/g2.2432.8182.8182.865異歐前胡素(mg/g)1.6632.0482.238總香豆素(mg/g)3.9064.8645.103表2可知,以8倍量的80%乙醇連續(xù)提取3次時(shí),提取效果較好。313不同提取時(shí)間對(duì)總香豆素含量的彩響將提取次數(shù)固定為3次乙醇濃度固定為80%溶媒量固定為8倍分別按05、1、1.5和2h進(jìn)行提取,考查不同提取時(shí)間對(duì)總香豆素含量的影響,結(jié)果見(jiàn)表3褻3不同提取時(shí)間對(duì)總香豆素含量的影響提取時(shí)間(h)1.5歐前胡素(mg/g)2.2432.8182.875異歐前胡素(mg/g)2.0481.967總香豆素(mg/g)3.7064.8644.802表3可見(jiàn),8倍量80%的乙醇連續(xù)提取3次,提取時(shí)間2h提取效果最好,但與1h的提取率相比變化很小,綜合考慮提取時(shí)間定為h較為理想。31.4不同提取次數(shù)對(duì)總香豆素含量的影響將乙醇濃度固定為80%溶媒量固定為8倍,提取時(shí)間為1h。分別按1、2、3次和4次進(jìn)行提取,考查不同提取次數(shù)對(duì)總香豆素含量的影響結(jié)果見(jiàn)表4衷4不同提取次數(shù)對(duì)總香豆含量的影響提取次數(shù)(次)歐前胡素(mg/g)2.6183.2473.7023.633異歐前胡素(mg/g)2.0352.879總香豆素(mg/g)4.6535.6346.5816.342由表4可見(jiàn),相同條件下提取3次時(shí),提取效果最好4結(jié)論由以上分析和表給數(shù)據(jù)可以看出,白芷的最佳提取條件為8倍量80%乙醇回流提取3次,每次2h,但提取lh與2h總香豆素含量變化很小,考慮到能源問(wèn)題擬將提取時(shí)間確定為h較為理想?yún)⒖嘉墨I(xiàn)中國(guó)煤化工CNMHG[1]張富強(qiáng)聶紅,韋藝等白芷的化學(xué)與藥理研究進(jìn)展[冂南京中醫(yī)藥大THS[2]陳賢春王玉蓉路世鵬白芷提取工藝的研究[中成藥,2005,27(2):145-147[3]王健,劉明浩徐恩民等薄層掃描法測(cè)定白芷中歐前胡素的含量[J藥物分析雜志19888(2)[4]王立人,李宏宇謝成科.川白正香豆素類成分的高效液相色譜分析[冂]藥學(xué)學(xué)報(bào),1990,25(2);131第3期索建蘭等:白芷的提取工藝1623[5]周繼銘,余朝菁,喬智慧等.白芷的研究[]中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,19888(11):505-50Extraction Process of Radix Angelicae DahuricaeSuo Jian-Lan YuAN Jia-Mei( De partment of Chemistry and Chemical Engineering, Baoji University of Arts and Sciences, Baoji Shaanxi 721013, P R. ChinAbstract The parameters of extraction process Radir angelicae Dahuricae were optimized bysingle factor test, with the contents of imperatorin and isomperatorin as index, and the factors oforthogonal design were carried out, the factors including the concentration of ethanol, the dosage ofethanol, the extraction time and extraction times. the results indicated that the optimal extractionprocess was obtained as follows: the ethanol concentration of 80% for 8 times dosage and theextraction times of 3 for each time of lhKey words Radix Angelicae Dahuricae; Imperatorin; Isomper atorin; High Performance LiquidChromatography; Ethanol Reflux Extraction; Immersion Extraction歡迎參觀《北京天科郵票展覽館》《北京天科郵票展覽館》由《科學(xué)家紀(jì)念郵票展覽館》《陸達(dá)紀(jì)念館)和《盧嘉錫紀(jì)念館等3部分組成是本刊興辦的公益性企業(yè),免費(fèi)參觀在北京市工商行政管理局注冊(cè)號(hào)為:110229009367903;北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局頒發(fā)的組織機(jī)構(gòu)代碼為:78616185X北京市國(guó)家稅務(wù)局和北京市地方稅務(wù)局頒發(fā)的稅務(wù)登記證號(hào)為:l1022978616185X;中國(guó)人民銀行頒發(fā)的開(kāi)戶許可證核準(zhǔn)號(hào)為:J1000047864702;開(kāi)戶行為:北京市農(nóng)商銀行夏都支行,賬號(hào):14030001030000416。國(guó)有土地使用證的證號(hào)為:京延國(guó)用(2002出)字第283號(hào);房屋所有權(quán)證的證號(hào)為:京房權(quán)證延私字第09140號(hào);社會(huì)保險(xiǎn)登記證號(hào)為社險(xiǎn)京字110229010052?！犊茖W(xué)家紀(jì)念郵票展覽館》展品內(nèi)容:古今世界各國(guó)發(fā)行的有關(guān)科學(xué)家或他們的發(fā)明創(chuàng)造的紀(jì)念郵票(復(fù)印件),大小為210×297mm(A4紙),共有529件。其中190位科學(xué)家為諾貝爾獎(jiǎng)得主。每件展品均附有本館編輯的有關(guān)科學(xué)家的簡(jiǎn)介,并如實(shí)敘述一些科學(xué)家的學(xué)術(shù)觀點(diǎn),僅供參考?！蛾戇_(dá)紀(jì)念館》展品內(nèi)容:1.紀(jì)念陸達(dá)同志(代序,王鶴壽);2,陸達(dá)傳略;3.《陸達(dá)紀(jì)念館》照片目錄;4.《陸達(dá)紀(jì)念館》照片(共35張);5.《陸達(dá)紀(jì)念館》(后語(yǔ)周開(kāi)億)《盧嘉錫紀(jì)念館》展品內(nèi)容:1.偉人已逝風(fēng)范長(zhǎng)存一紀(jì)念盧嘉錫先生(幸振乾);2.盧嘉錫生平;3.《盧嘉錫紀(jì)念館》照片目錄;4.《盧嘉錫紀(jì)念館》照片(共65張);5.《盧嘉錫紀(jì)念館》(后語(yǔ))(《光譜實(shí)驗(yàn)室》編輯部)。3館展品內(nèi)容已分別在《光譜實(shí)驗(yàn)室》2007年第1期、2008年第1期和2009年第1期刊登并出有單行本。參觀須知:1.參觀者應(yīng)當(dāng)具有高中(含》以上文化程度;2.地址:北京市延慶縣劉斌堡鄉(xiāng)劉斌堡村東,劉斌堡鄉(xiāng)中心小學(xué)東側(cè);3.展廳面積300平方米;綠化面積300平方米;4.館內(nèi)禁止吸煙禁止觸摸展品;保持清潔衛(wèi)生,愛(ài)護(hù)花木和陳設(shè);每人入館時(shí)間不得超過(guò)2小時(shí);5赴館乘車路線:北京德勝冂乘919路公交車到終點(diǎn)站(延慶站快車12元,1小時(shí)30分;慢車8元,有“一卡通”者4折),再乘920路公交車或小面包車到“劉斌堡東”站下車即到(5元,25分鐘);6·參觀者請(qǐng)1-3日前申話預(yù)約登記,聯(lián)系申話:(010)62183031;52513126;13716729706。中國(guó)煤化工注陸達(dá)鋼鐵研究總院前院長(zhǎng);盧嘉錫,中國(guó)科學(xué)院前院長(zhǎng):王鶴CNMHG共中央紀(jì)律檢查委員會(huì)副書(shū)記章振乾福建省民盟名譽(yù)主委廈門大學(xué)原教務(wù)長(zhǎng)《光譜實(shí)驗(yàn)宣》編輯部