中藥藥理與臨床200723(1)47同濃度的半枝蓮含藥大鼠血清分別處理人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞株P(guān)G細(xì)胞采用流式細(xì)胞儀法觀察其對(duì)PG細(xì)胞bl2基因表達(dá)的影響結(jié)果經(jīng)半枝蓮含藥血清作用的PG細(xì)胞bl-2基因表達(dá)明顯降低。結(jié)論半枝蓮抗腫瘤作用機(jī)制可能與bcl-2基因表達(dá)減少有關(guān)。關(guān)鍵詞半枝蓮肺癌細(xì)胞PGel-2半枝蓮( Scutellaria barbata D.Don)作為一種常用的抗腫瘤表1半枝蓮含藥血清對(duì)PG細(xì)胞bc2基因表達(dá)的影響(x±s)中藥對(duì)肝癌、肺癌、胃癌、直腸癌、鼻咽癌等均有一定的療效。在多種腫瘤組織中由于lcl-2基因異常的高表達(dá)可使腫瘤細(xì)胞0%正常血清46.28±2.79群逃避和減少凋亡造成增殖細(xì)胞群的細(xì)胞數(shù)量增多。本文試5%含藥血清35.41±1.83圖從bl-2基因表達(dá)的角度來探討半枝蓮的抗腫瘤作用機(jī)制10%含藥血清15%含藥血清17.61±2.241材料DDP3.82±1.810%含藥血清+DDP2.51±1,01.1試驗(yàn)藥物半枝蓮購自濟(jì)南市建聯(lián)中藥店并由山東中醫(yī)與正常血清組比較*P<0.05,**P<0.01藥大學(xué)中藥鑒定室鑒定。稱取半枝蓮200g加適量水浸泡13討論2h水煎煮提取兩次合并提取液濃縮成一定濃度(劑量為50g生藥/kg)即得半枝蓮水提取物。順鋃(DDP)齊魯制藥有限hel-2是濾泡型B細(xì)胞淋巴瘤/白血病2(B- cell lymphoma.公司leukemia-2lel-2)的縮寫人bel-2基因是從與濾泡性淋巴瘤相12動(dòng)物與細(xì)胞株Wim大鼠雄性,體重20240g由山關(guān)的(14:8)染色體易位的斷裂點(diǎn)克隆到的。在此易位中,東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。人肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞株P(guān)G細(xì)bcl2從其正常位點(diǎn)18q21)易位到與位于142的免疫球蛋白胞由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)所提供重銥lgH)座位并列的位置這導(dǎo)致在淋巴瘤細(xì)胞中該基因的1.3儀器與試劑流式細(xì)胞儀 FACScan型美國BD公司),轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)以及26kbb2蛋白的過度表達(dá)。bol2基因是一種細(xì)倒置相差顯微美國AO);藻紅蛋白(PE)蕨光素標(biāo)記的鼠抗胞凋亡抑制基因J-2基因蛋白定位于核膜皺折處、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜人bcl2單抗lgGl及用于免疫陰性對(duì)照lgGl-PH(美國 Pharmic及線粒體膜上。bel-2蛋白不阻止藥物進(jìn)入細(xì)胞也不抑制藥物gen公司)RPM640培養(yǎng)基 Gibco公司)小牛血漬杭州四季引起的DNA損傷但bkl2蛋白具有保持細(xì)胞不死亡的抗凋亡青生物材料研究所)膜蛋白釃GBCO分裝伯安生命技術(shù)有作用。在多種腫瘤組織中由于它異常的高表達(dá)可使腫瘤限公司細(xì)胞群逃避和減少凋亡造成增殖細(xì)胞群的細(xì)胞數(shù)量增多這與腫瘤的惡性生物學(xué)行為和預(yù)后不良有密切關(guān)系2方法與結(jié)果本實(shí)驗(yàn)采用流式細(xì)胞儀分析半枝蓮含藥血清對(duì)PG細(xì)胞bl2基因表達(dá)的影響結(jié)果表明不同濃度半枝蓮含藥血清作2.1含藥血清的制備大鼠20只隨機(jī)分二組。含藥血清組用于腫瘤細(xì)胞后可明顯抑制的b2的高表達(dá),且存在明顯的每日分別半枝蓮4ml次2次/日灌胃正常血清組毎日給予等量效關(guān)系。而且半枝蓮含藥血清與DDP合用與單用DDP組比量生理鹽水灌胃。連續(xù)給藥3天末次給藥后1乙醚麻醉腹較無顯著性差異提示半枝蓮扣制腫瘤細(xì)胞內(nèi)凋亡抑制基因主動(dòng)脈無菌采血,置無菌離心管離心1500rpml0min無菌分離bel-2的表達(dá)可能是其抗腫瘤作用的主要機(jī)制之-影響其基血清經(jīng)56℃、30分鐘滅活用0.22μm微孔濾膜過濾除菌分因表達(dá)的因素還有待進(jìn)一步研究。裝入小瓶置20℃冰箱保存?zhèn)溆脜⒖嘉墨I(xiàn)2.2流式細(xì)胞儀檢測(cè)取對(duì)數(shù)生長期的PG細(xì)胞經(jīng)0.25%胰1邵世濱紀(jì)學(xué)師B2基因在腫瘤組織中表達(dá)的研究進(jìn)展臨沂醫(yī)酶消化汁數(shù)以2×10°/ml的量接種于培養(yǎng)瓶中37℃5%CO2學(xué)?？茖W(xué)校學(xué)報(bào)2004262)145-147含10%小牛血清的1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時(shí)至細(xì)胞生長旺2臧運(yùn)華李震李潔等.益氣養(yǎng)陰方對(duì)K62細(xì)胞d2及p53基因盛貼壁后,去掉原培養(yǎng)液,分別加入不同濃度的含藥血清及表達(dá)的影響山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)2004283)234-235DDP于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)ρ.25%胰酶消化離心用3 Roth W Grimme C Rieger L et al.Bag- and bel-2ε ene transfer in maPBS液洗滌2次制成細(xì)胞懸液取200μl加bcl-2單抗工作液 lignant glioma: modulation of cell cycle regulation and apoptosis, Brain20μl另1支加陰性對(duì)照單抗IGPE避光反應(yīng)20min,上機(jī)檢 Pathol2002)223-234測(cè)結(jié)果見表1。4 Blagosklonny MV, Unwinding the loop of Bcl-2 phosphorylation. Leuke-mia,20015:869~874大泡通乙醇提取物鎮(zhèn)痛抗炎作用研究殷勇冠易艷東'鄭有順南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院廣州510515;武漢第一醫(yī)院武漢430022)48中藥藥理與臨床200723(1)脹法觀察其抗炎作用。結(jié)果:大泡通乙醇提取物能顯著抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹及角叉菜膠致大鼠足腫脹提高熱板法小鼠痛閾值。結(jié)論大泡通乙醇提取物具有明顯鎮(zhèn)痛、抗炎作用。關(guān)鍵詞大泡通抗炎鎮(zhèn)痛大泡通( Impatiens pritzellii Hook. f.war. hupehensis Hook)2.2對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響小鼠50只隨機(jī)為五加科植物惠序鵝掌柴其根或根皮入藥能祛風(fēng)活絡(luò)治骨分為5組灌胃給藥3d毎天兩次第3天給藥30min后涂二甲折挫傷風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛腰肌勞損。本文對(duì)其鎮(zhèn)痛抗炎作用進(jìn)苯于小鼠左耳致炎30min后脫臼處死用打孔器銃取雙耳稱行了研究重左右耳的重量差作為腫脹度結(jié)果對(duì)照組為(3.31±0.54)材料mng阿司匹林200mg/kg為(1.45±1.25)mg大泡通高、中、低1.1試驗(yàn)藥物與試劑大泡通乙醇提取物由本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)劑量組分別為(1.99±1.69)mg(1.78±1.54)mg和(1.55±方法提取配成高、中、低不同濃度備用。阿司匹林用1%CMC0.35加g表明大泡通對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯抑制作配成相應(yīng)濃度的懸浮液。角叉菜膠 sigma公司。用。1.2動(dòng)物昆明小鼠,?♂各半體重(20±2)gSD大鼠,2.3小鼠熱板法試驗(yàn)♀小鼠50只體重20±2g55.0±♂體重(200±20)g購自同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。0.5℃熱板以舔后足反應(yīng)為指標(biāo)預(yù)選痛閾在5-15s內(nèi)小鼠402方法與結(jié)果只隨機(jī)分成4組灌胃給藥測(cè)定給藥后1、2h的痛閾60s內(nèi)不2.1大泡通對(duì)角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響大鼠40只隨發(fā)生舔足反應(yīng)者按60s計(jì)算。結(jié)果大泡通1g/kg使小鼠痛閾提機(jī)分成5組灌胃給藥后1h于每只大鼠右后腳足跖皮下注射高3.5(28%)和5544%),阿司匹林200 mg/kg組提高1%角叉菜50μ致炎玻璃容積法測(cè)量致炎前及致炎后1、2、5.4(44%)和4.6(37%),兩者基本相當(dāng)3、4和5h足容積計(jì)算腫脹度和各組的腫脹抑制率。結(jié)果各藥物組于致炎后0.5h至6h與對(duì)照組比較均有顯著性差異提示3討論藥物對(duì)角叉菜膠所致大鼠足腫脹有明顯抑制作用結(jié)果見表1。大泡通在民間主要用于風(fēng)濕病的治療所以本實(shí)驗(yàn)對(duì)大泡表1大泡通乙醇提取物抑制大鼠足跖腫脹試驗(yàn)(%x±s)通乙醇提取物抗炎鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了研究結(jié)果大泡通乙醇提取物能顯著抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹及角叉菜膠致大鼠足腫16.5±6.8·,18.9±71··26.8±8.1·,31.1±脹提高熱板法小鼠痛閾值表明大泡通乙醇提取物具有明顯大泡通1133213:313:22鎮(zhèn)痛、抗炎作用。與對(duì)照組比較·P<0.05,P<0.01A Study on anti-inflammatory and analgesic effect of dapaotong alcohol extractiveSouth University of Medical Sciences Guangzhou 510515)Objective: To study the anti-inflammatory and analgesic effects of Dapaotong s alcohol-extractive( DAE ) Menthods: The hot-plate testear edema induced by dimethylbenzene and swelling of rat paw induced by carrageenin were used to study the analges and anti-inflammatoryeffects. Result: DAE could inhibit the mouse ear edema induced by dimethy benzene , inhibit the rat foot swelling induced by carrageeninand increase the mice pain threshold induced by hot plate. Conclusion: DAE has anti-inflammatory and analgesic effectsKwy words Dapaoton(大泡通); analgesic effect; anti-inflammation effect烏骨雞正己烷提取物補(bǔ)血作用研究田穎剛謝明勇“·吳紅靜王維亞唐永富(南昌大學(xué)食品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南昌330047)摘要目的探討烏骨雞正己烷提取物的補(bǔ)血作用。方法洄服預(yù)防給藥后用放血法制作小鼠失血性血虛證模型乙酰