液相色譜流動相使用時的10個壞習慣,你中招了嗎?
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我們在以前的文章中給大家講過在流動相使用過程中應該做的事情,除了有所為,還要有所不為,那有哪些習慣是需要避免的呢?
通常情況下測量流動相的PH值,是測量 水相中的PH值 參數(shù)。有機相加入之后PH值參數(shù)的測量就和之前有誤差。
PS:但如果能保證每次測量都是加入相同量的有機相之后得到的PH值,雖然這不能保證精確度,但是這能保證前后一致的測量結(jié)果,所以這樣也沒有問題。
緩沖鹽的加入是用來 控制和修正流動相中PH值的改變 的。
樣品基質(zhì)、空氣中的CO2、水中的雜質(zhì)都會造成流動相PH值的改變,而PH值的改變會影響樣品的保留、峰形、峰面積參數(shù)。
每個緩沖鹽都有一定的緩沖范圍,在此范圍內(nèi)它提供了最佳的pH穩(wěn)定性。在這個范圍外,緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。
所以要么 在正確的范圍內(nèi)使用緩沖鹽 ,要么選擇一個 緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽 。
如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會大大增加緩沖鹽析出的風險。
緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產(chǎn)生一定影響。
(延伸閱讀:做完樣品記得移除系統(tǒng)中的緩沖鹽哦!)
現(xiàn)在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的 出現(xiàn)氣泡和沉淀 的風險。
(延伸閱讀:深度剖析等度洗脫和梯度洗脫的適用范圍和方法設置)
緩沖溶液的修飾酸或堿,只使用 生成緩沖鹽的酸或堿 。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)。
例如只在方法中寫“稱5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。
緩沖鹽的類型決定其pH緩沖范圍,而 緩沖鹽中所需物質(zhì)的 濃度 決定了緩沖強度 。例如:5g的無水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強度,會影響保留率。
如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道使用了純的有機溶劑,那么就會造成該通道 緩沖鹽析出、出現(xiàn)堵塞 等風險。
溶劑瓶中的流動相如果用干,會導致儀器中 出現(xiàn)氣泡 等問題。
超聲脫氣有一定的脫氣作用,但完全脫氣的效果并不理想。
所以在此建議使用 真空脫氣機 進行在線脫氣。
在使用流動相時,還有哪些壞習慣需要避免呢?歡迎大家分享自己的經(jīng)驗哦!
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