譚亞軍,馬霄*.聯(lián)合疫苗研發(fā)關(guān)鍵技術(shù)[J].中國食品藥品監(jiān)管,2023(12):58-63.

譚亞軍

中國食品藥品檢定研究院百白破疫苗和毒素室

國家衛(wèi)生健康委員會生物技術(shù)產(chǎn)品檢定方法及其標(biāo)準(zhǔn)化重點實驗室

國家藥品監(jiān)督管理局生物制品質(zhì)量研究與評價重點實驗室

TAN Ya-jun

National Institutes for Food and Drug Control, DTP Vaccine and Toxin Laboratory

NHC Key Laboratory of Research on Quality and Standardization of Biotech Products

NMPA Key Laboratory for Quality Research and Evaluation of Biological Products

馬霄*

中國食品藥品檢定研究院百白破疫苗和毒素室

國家衛(wèi)生健康委員會生物技術(shù)產(chǎn)品檢定方法及其標(biāo)準(zhǔn)化重點實驗室

國家藥品監(jiān)督管理局生物制品質(zhì)量研究與評價重點實驗室

MA Xiao*

National Institutes for Food and Drug Control, DTP Vaccine and Toxin Laboratory

NHC Key Laboratory of Research on Quality and Standardization of Biotech Products

NMPA Key Laboratory for Quality Research and Evaluation of Biological Products

傳染病流行是威脅人類健康和生命安全的重要問題?？v觀人類抗擊傳染病的歷史，疫苗接種是控制和消滅傳染病最有效、最經(jīng)濟(jì)的衛(wèi)生措施之一。我國自1978年起積極響應(yīng)并正式實施兒童計劃免疫，目前免疫規(guī)劃疫苗已有14種，其中單價疫苗有9種，占全部疫苗的64% ^[1] 。與此同時，非免疫規(guī)劃疫苗的研發(fā)和應(yīng)用也得到不斷豐富。隨著家長的防病意識逐漸提高，越來越多的家長希望為孩子接種更多的疫苗。然而，由于疫苗本身特性和疾病流行情況，大多數(shù)兒童用疫苗集中在小年齡段接種，勢必造成嬰幼兒期疫苗接種過于頻繁，或?qū)⒚媾R接種部位不夠用的問題，另外還存在增加衛(wèi)生部門的接種成本、降低幼兒接種的依從性、增加發(fā)生疑似不良反應(yīng)的風(fēng)險等問題。為此，世界衛(wèi)生組織一直倡導(dǎo)接種聯(lián)合疫苗來減少以上問題發(fā)生的可能 ^[2] ，美國和歐盟則通過法規(guī)引導(dǎo)聯(lián)合疫苗的開發(fā)生產(chǎn)，比如允許不同的上市許可持有人合作開發(fā)聯(lián)合疫苗、允許企業(yè)開展同時接種的探索性臨床研究等，我國《疫苗管理法》也明確指出國家支持多聯(lián)多價等新型疫苗的研制。

聯(lián)合疫苗包括多聯(lián)疫苗和多價疫苗。多聯(lián)疫苗用于預(yù)防不同病原微生物引起的疾??；多價疫苗用于預(yù)防同一種病原微生物的不同血清型/株引起的疾病 ^[3] 。相比于單價疫苗，聯(lián)合疫苗優(yōu)勢明顯，主要體現(xiàn)在：(1)可以減少接種劑次，簡化免疫程序，提高疫苗接種率和及時性，特別是在特殊原因?qū)е聝和呙邕t種或漏種的情況下，聯(lián)合疫苗可以發(fā)揮更大的優(yōu)勢。(2)可以通過減少接種次數(shù)而降低嬰幼兒因接種造成的疼痛、壓力和不適，提高依從性。(3)可以相對減少疫苗中總佐劑、防腐劑或穩(wěn)定劑的用量，降低不良反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險。(4)可以減少家長攜帶嬰幼兒往返接種單位的頻次、時間和誤工成本，還可在一定程度上降低嬰幼兒與家長等陪同人員感染相關(guān)傳染病的風(fēng)險。(5)可以減少接種人員的工作量，提高工作效率，降低潛在的接種差錯和管理風(fēng)險。(6)可以簡化疫苗供應(yīng)，減少冷鏈存儲難度和縮減存儲空間，降低接種成本。因此，聯(lián)合疫苗是未來疫苗發(fā)展的重要方向之一。

安全、有效和質(zhì)量可控是疫苗開發(fā)的3項基本原則，聯(lián)合疫苗的研發(fā)也必須遵循上述原則。聯(lián)合疫苗不是簡單地將各個疫苗或抗原組分的混合，其在開發(fā)時應(yīng)充分考慮多種組分聯(lián)合后產(chǎn)生的相互作用對疫苗安全性和有效性的影響，以及聯(lián)合疫苗中其他非抗原成分對有效抗原的影響。聯(lián)合疫苗的質(zhì)量控制包括對疫苗中各個組分的檢測，以及對疫苗整體質(zhì)量的檢測。在臨床研究中，應(yīng)采用聯(lián)合疫苗中各組分分別但同時接種作為對照組，同時還應(yīng)充分評估各組分在體內(nèi)的相互作用而產(chǎn)生的影響。因此，不能簡單地采用一種固定的模式研究聯(lián)合疫苗的安全性和有效性。根據(jù)聯(lián)合疫苗的研究經(jīng)驗和結(jié)果，我國制定了《聯(lián)合疫苗臨床前和臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，從疫苗研發(fā)生產(chǎn)、質(zhì)量控制、臨床研究多個方面對聯(lián)合疫苗的開發(fā)提出要求 ^[4] 。

另外，在聯(lián)合疫苗臨床研究中，還需要考慮到聯(lián)合疫苗中已有抗原成分對免疫程序中其他疫苗有效性、安全性的影響。比如，現(xiàn)在的肺炎球菌結(jié)合疫苗（pneumococcal conjugate vaccine,PCV）、腦膜炎球菌結(jié)合疫苗（meningococcal conjugate vaccine,Men）大多含有白喉類毒素（diphtheria toxoid,DT）或者破傷風(fēng)類毒素（tetanus toxoid,TT）作為多糖載體，許多聯(lián)合疫苗也含有白喉或者破傷風(fēng)抗原成分，因此，需要評價含相同抗原成分的聯(lián)合疫苗和其他疫苗免疫有效性的相互影響。

由于聯(lián)合疫苗的抗原種類多、含量高、免疫機(jī)制復(fù)雜，在聯(lián)合疫苗臨床研究中，還需要進(jìn)一步評價對計劃免疫程序中接種時間較近的其他疫苗安全性、有效性的相互影響。中國食品藥品檢定研究院積極開展了含無細(xì)胞百白破疫苗（diphtheria,tetanus and acellular pertussis vaccine,DTa P）組分的聯(lián)合疫苗與其他免疫程序相近疫苗的有效性相互影響研究，對DTa P基礎(chǔ)免疫與PCV、Men、脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗（inactivated poliomyelitis vaccine,IPV）、b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗（haemophilus influenzae type b conjugate vaccine,Hib），以及DTa P加強(qiáng)免疫與水痘疫苗（varicella vaccine,Var）的有效性是否存在相互干擾進(jìn)行了臨床評價研究，結(jié)果表明上述疫苗對DTa P疫苗的有效性無顯著影響。

目前，世界上已批準(zhǔn)使用的聯(lián)合疫苗有幾十種。按照所含抗原種類劃分，聯(lián)合疫苗分為細(xì)菌蛋白組成的聯(lián)合疫苗、細(xì)菌多糖組成的聯(lián)合疫苗、病毒組成的聯(lián)合疫苗以及不同類別成分組成的聯(lián)合疫苗，如蛋白-多糖成分組合、蛋白-病毒成分組合、蛋白-多糖-病毒成分組合等。

由于蛋白類抗原本身具有免疫原性和抗原性，不同蛋白抗原間的免疫相互影響較小，采用不同蛋白抗原聯(lián)合制備是聯(lián)合疫苗開發(fā)中最常用的技術(shù)路線之一。細(xì)菌蛋白組成的聯(lián)合疫苗中最具代表性的是百日咳、白喉和破傷風(fēng)聯(lián)合疫苗（DTP），是由百日咳菌體或百日咳抗原組分、精制DT和TT按適當(dāng)比例配制而成，并吸附在氫氧化鋁或磷酸鋁佐劑上，用于預(yù)防百日咳、白喉和破傷風(fēng)3種疾病 ^[5] 。

細(xì)菌中存在多種糖類物質(zhì)，它們在細(xì)菌的識別、信號傳遞、黏附、感染及防御等方面發(fā)揮著重要作用。由于多糖的免疫原性，將特異性的多糖純化后制成的疫苗稱為多糖疫苗。多糖蛋白結(jié)合疫苗是通過化學(xué)方法將多聚核糖基核糖醇磷酸酯（polyribosylribitol phosphate,PRP）與載體蛋白共價結(jié)合，抗原類型從胸腺非依賴性抗原轉(zhuǎn)變?yōu)樾叵僖蕾囆钥乖?，能激發(fā)2歲及以下兒童、老年人和免疫缺陷者體內(nèi)產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，并產(chǎn)生免疫記憶。Men、Hib和PCV多糖結(jié)合疫苗是兒童期免疫接種非常重要的一類疫苗。由于肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌等致病菌的細(xì)菌莢膜多糖抗原不同，可以分為多個血清型。為了能覆蓋臨床中主要致病的血清型，采用多種細(xì)菌血清型特異性多糖成分或者多糖-載體蛋白結(jié)合組合的多價疫苗是聯(lián)合疫苗另一主要技術(shù)路線。從細(xì)菌多糖組成的聯(lián)合疫苗的實際研發(fā)過程中，可以看出不同多糖結(jié)合疫苗在聯(lián)合時應(yīng)重點考慮不同載體蛋白的適用性、各抗原含量的配方比例等，以及在保證疫苗抗原發(fā)揮最大免疫原性的前提下，如何確定抗原的最低含量和載體蛋白的種類及含量。

病毒組成的聯(lián)合疫苗主要分為三類：滅活病毒聯(lián)合疫苗、減毒活聯(lián)合疫苗、病毒蛋白抗原的多價疫苗。滅活病毒聯(lián)合疫苗包括以乙型肝炎疫苗（hepatitis B vaccine,HBV）為基礎(chǔ)的聯(lián)合疫苗，如甲型乙型肝炎聯(lián)合疫苗、正在開發(fā)的腸道病毒71型-柯薩奇病毒A組16型聯(lián)合滅活疫苗等；減毒活聯(lián)合疫苗主要包括以麻疹-腮腺炎-風(fēng)疹疫苗為基礎(chǔ)的聯(lián)合疫苗，如麻腮風(fēng)聯(lián)合疫苗（measles,mumps and rubella vaccine,MMR）、麻腮風(fēng)水痘聯(lián)合疫苗（measles,mumps,rubella and varicella vaccine,MMRV) ^[6-8] ；病毒蛋白抗原的多價疫苗以多價人乳頭瘤病毒疫苗為代表。

需要注意的是，聯(lián)合疫苗中可能存在病毒疫苗間的干擾現(xiàn)象，如高濃度的麻疹和腮腺炎疫苗毒株易被干擾，Var與MMR同時免疫會抑制Var免疫應(yīng)答，可通過提高Var劑量避免這一弊端。

不同類別成分組成的聯(lián)合疫苗中包括細(xì)菌蛋白、細(xì)菌多糖、病毒蛋白等各類抗原成分，是現(xiàn)今聯(lián)合疫苗開發(fā)的主要方向。在開發(fā)中除了需要考慮抗原成分相容性等因素外，還需要充分考慮免疫程序的相容性，將免疫程序接近的不同類別疫苗聯(lián)合是這類疫苗開發(fā)的重點。

新型聯(lián)合疫苗的發(fā)展開始于DTP聯(lián)合疫苗。原因主要是百日咳、白喉和破傷風(fēng)這3種兒童傳染病在短期內(nèi)尚不能消滅，會長期使用這種疫苗；DTP聯(lián)合疫苗安全性好，2月齡即可接種；DTP聯(lián)合疫苗中的DT、TT抗原性質(zhì)穩(wěn)定，與其他抗原成分聯(lián)合不易產(chǎn)生干擾現(xiàn)象等。其中，DTa P聯(lián)合疫苗中各抗原組分均為純化抗原，組分清晰，更利于分析不同抗原間、抗原與非抗原成分間的相互作用，現(xiàn)今以DTP為基礎(chǔ)的聯(lián)合疫苗多為DTa P聯(lián)合疫苗 ^[9-10] 。

基于上述原因，在傳統(tǒng)DTP聯(lián)合疫苗的基礎(chǔ)上，含其他各種疫苗成分包括多糖成分、滅活病毒成分的新型聯(lián)合疫苗得到了飛速發(fā)展。Hib免疫程序與DTP的免疫程序完全相同，IPV、HBV免疫程序與DTP基礎(chǔ)免疫程序部分相同或具有相似性，具備較好或一定的多聯(lián)疫苗研發(fā)基礎(chǔ)。Hib、IPV和HBV與DTP聯(lián)合組成的四聯(lián)、五聯(lián)、六聯(lián)疫苗相繼問世。此外，還有兒童用百白破-IPV疫苗和成人用百白破-IPV疫苗等。越來越多的國家和地區(qū)逐步開始使用含百白破成分的四聯(lián)、五聯(lián)或六聯(lián)疫苗。其中，超過100個國家和地區(qū)將DTP-HBV-Hib作為基礎(chǔ)免疫，在有關(guān)國際組織的援助支持下，多在中低收入國家和地區(qū)使用。

雖然近年來成功研發(fā)的和正在研發(fā)的聯(lián)合疫苗種類日益增多，但是聯(lián)合疫苗并不是簡單地將多個單價疫苗的混合，在其研發(fā)、制備、評價和使用中還存在許多關(guān)鍵問題需要深入研究和解決，面臨很多挑戰(zhàn)，包括全液體劑型技術(shù)、載體蛋白免疫原性評價及與聯(lián)合疫苗中已有抗原成分的替代、佐劑對聯(lián)合疫苗中抗原成分的影響、免疫程序?qū)β?lián)合疫苗的影響等。

由于含DTP成分的聯(lián)合疫苗多數(shù)含有多糖結(jié)合疫苗組分，而鋁佐劑對部分多糖結(jié)合疫苗的有效性有一定影響，因此現(xiàn)有的聯(lián)合疫苗大多是將多糖結(jié)合疫苗組分單獨分裝，臨用前混合，以最大程度降低影響。但是，臨用前混合使用仍有無菌風(fēng)險和使用過程中發(fā)生錯誤的風(fēng)險。全液體劑型聯(lián)合疫苗通過對佐劑工藝和制劑工藝的優(yōu)化，開發(fā)單劑量、單一包裝、無需臨用前混合的疫苗成品，避免了凍干工藝引入的安全性風(fēng)險及產(chǎn)能的限制，同時避免了凍干疫苗在免疫接種前需進(jìn)行繁瑣的復(fù)溶過程，大大降低了接種安全性風(fēng)險和工作量。從疫苗工藝的先進(jìn)性來說，全液體疫苗更勝一籌，操作效率更高，更有利于安全注射。

在全液體疫苗的研發(fā)過程中，關(guān)鍵是通過抗原在液體制劑中的穩(wěn)定性研究、各抗原組分間相互作用的評估、抗原含量的優(yōu)化、制劑工藝的革新，研制出安全有效、使用方便的產(chǎn)品，對于含佐劑的疫苗制劑，還應(yīng)包括佐劑的制劑配方對抗原穩(wěn)定性的影響等。

百白破疫苗和多糖蛋白結(jié)合疫苗常被開發(fā)為聯(lián)合疫苗或聯(lián)合接種或間隔接種使用。目前多糖蛋白結(jié)合疫苗中所用的載體蛋白主要是DT、TT和白喉毒素的無毒突變體交叉反應(yīng)物質(zhì)197(cross-reacting material 197,CRM197）。DT和TT既作為疫苗抗原來免疫，又作為多糖結(jié)合疫苗的載體蛋白來重復(fù)應(yīng)用，是否會對疫苗的免疫原性產(chǎn)生影響越來越受到研究人員的關(guān)注。主要包括以下幾種情況：載體蛋白啟動效應(yīng)，載體蛋白誘導(dǎo)的表位抑制效應(yīng)（carrier-induced epitope suppression,CIES）和旁觀者干擾效應(yīng)。

載體蛋白啟動效應(yīng)一般是先接種含有DT或TT的疫苗，再接種含相同載體的多糖結(jié)合疫苗，對疫苗免疫應(yīng)答所產(chǎn)生的效應(yīng)。這種預(yù)先誘導(dǎo)的針對載體蛋白的抗體可能會增強(qiáng)連接在同一載體蛋白上的多糖的免疫應(yīng)答，但預(yù)存的過量載體蛋白抗體也有可能會抑制連接在同一載體蛋白上的多糖的免疫應(yīng)答。載體蛋白啟動效應(yīng)增強(qiáng)免疫應(yīng)答可能是針對載體蛋白的特異性輔助性T細(xì)胞（T helper cell,Th）和T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞因子增加所致。在動物體內(nèi)進(jìn)行的幾項試驗顯示，低劑量TT(0.025～0.25μg）初免對以TT為載體的PCV-TT和MenTT的多糖抗體應(yīng)答具有增強(qiáng)作用；但高劑量TT(25μg）初免則會對多糖抗體應(yīng)答產(chǎn)生抑制作用。在兒童和成人中也觀察到了大量的載體蛋白啟動效應(yīng)。與未接種TT或DT疫苗的嬰兒相比，提前接種TT或DT疫苗，然后接種Hib-TT/DT的嬰兒在初次接種和加強(qiáng)接種Hib后，PRP的抗體水平更高 ^[11-18] 。

除上文所述過量的載體蛋白初免可能會減弱多糖的免疫應(yīng)答以外，同時接種相同載體蛋白的多糖結(jié)合疫苗可能會引起多糖免疫應(yīng)答水平的降低，即載體蛋白誘導(dǎo)的表位抑制效應(yīng)。其中可能涉及的機(jī)制有：(1)預(yù)先存在的針對載體蛋白的抗體可能通過空間位阻效應(yīng)，有利于抗載體B細(xì)胞反應(yīng)，而不利于抗多糖B細(xì)胞反應(yīng)。(2)優(yōu)勢載體特異性B細(xì)胞可能通過競爭機(jī)制剝奪了多糖特異性B細(xì)胞、T細(xì)胞等必需資源。(3)在免疫應(yīng)答后期，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞會進(jìn)行負(fù)向調(diào)節(jié)，避免過強(qiáng)的免疫應(yīng)答 ^[11] 。研究顯示，11價雙載體肺炎球菌結(jié)合疫苗（Pnc DT/TT11,7個血清型多糖與TT偶聯(lián)，4個血清型多糖與DT偶聯(lián)）與全細(xì)胞百日咳疫苗（whole cell pertussis vaccine,w P）合用，破傷風(fēng)載體介導(dǎo)的反應(yīng)也可能受到一些抑制，但這種抑制被w P的輔助作用掩蓋了。通過將w P替換為無細(xì)胞百日咳疫苗（acellular pertussis vaccine,a P），這種佐劑效應(yīng)被消除，所有與TT結(jié)合的肺炎球菌結(jié)合物的反應(yīng)都顯著降低，顯示了載體蛋白誘導(dǎo)的表位抑制效應(yīng) ^[19] 。隨著嬰兒期使用多種含a P的疫苗的增加，可能需要新的佐劑和載體蛋白技術(shù)。

旁觀者干擾效應(yīng)即多種疫苗共同接種，會影響同類載體或以其他載體蛋白制備的多糖蛋白結(jié)合疫苗的免疫作用。以CRM197為載體蛋白的多糖蛋白結(jié)合疫苗，可能是通過DT和CRM197之間共用的T細(xì)胞機(jī)制介導(dǎo)，并且會影響共同接種的其他抗原。這種旁觀者干擾效應(yīng)在以CRM197為載體蛋白的結(jié)合疫苗使用中已被證實，特別是乙肝表面抗體（HBs Ab）和Hib抗體應(yīng)答容易受到干擾 ^[20] 。

針對聯(lián)合疫苗中已有抗原成分作為載體蛋白使用時會出現(xiàn)載體蛋白效應(yīng)，有可能降低疫苗免疫原性，迫切需要開發(fā)新的載體蛋白，避免聯(lián)合疫苗中已有抗原成分作為載體蛋白多次重復(fù)免疫接種。另外，應(yīng)探索優(yōu)化聯(lián)合疫苗中已有抗原的含量，可以通過有效性的評估適當(dāng)調(diào)整相應(yīng)抗原的含量，在保證有效性的同時降低抗原含量，獲得更佳的安全性。

鋁佐劑廣泛應(yīng)用于聯(lián)合疫苗，包括氫氧化鋁、磷酸鋁和無定形羥基磷酸鋁硫酸鹽。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)抗原吸附在鋁佐劑顆粒時，通過表面的相互作用，可能影響其構(gòu)象表位和穩(wěn)定性。氫氧化鋁的正表面電荷吸引帶負(fù)電荷的離子，在粒子附近形成表面層。與疫苗制劑溶液的p H值相比，氫氧根離子的吸引力使該層p H值增加了1～2個單位。磷酸鋁佐劑顆粒周圍的表面層p H值也會降低。吸附到鋁佐劑上的抗原暴露于與溶液中存在的抗原不同的p H值，這有可能會加速某些蛋白質(zhì)脫酰胺和氧化。微環(huán)境p H值的升高可能解釋了Hib莢膜多糖-蛋白結(jié)合物中的磷酸二酯鍵在被氫氧化鋁吸附后發(fā)生水解的原因，這種水解過程在堿性條件下會加速?？乖c鋁佐劑的吸附，可能對其穩(wěn)定性沒有影響，也可能降低或者增強(qiáng)穩(wěn)定性。采用生物、物理等技術(shù)方法對聯(lián)合疫苗中鋁佐劑對各抗原成分的影響進(jìn)行特異性評估非常必要。

抗原的吸附，通常會增強(qiáng)其免疫反應(yīng)。鋁佐劑的免疫刺激作用來自多種機(jī)制，包括減緩抗原從給藥部位擴(kuò)散，增加炎性細(xì)胞積聚，激活補(bǔ)體，誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為樹突狀細(xì)胞以及樹突狀細(xì)胞對抗原的攝取、抗原呈遞和CD4 ⁺ T細(xì)胞的活化等。但鋁佐劑誘導(dǎo)Th1和Th17應(yīng)答反應(yīng)弱，而這些應(yīng)答反應(yīng)可能是誘導(dǎo)針對瘧疾和結(jié)核等傳染病的保護(hù)性免疫所必需的。研究發(fā)現(xiàn)，針對不同機(jī)制激活免疫反應(yīng)的佐劑與鋁佐劑的結(jié)合可以產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，可能誘導(dǎo)更有效或更持久的免疫反應(yīng)，并可減少疫苗中的抗原使用量。

在聯(lián)合疫苗使用中，免疫程序的設(shè)定對疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫應(yīng)答有重要的影響。如DTa P-IPV-Hib聯(lián)合疫苗在法國的臨床試驗中，分別按2、3、4月齡和2、4、6月齡兩個免疫程序進(jìn)行免疫，后者誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性抗體普遍高于前者 ^[21-24] 。應(yīng)在臨床研究階段探索聯(lián)合疫苗的免疫程序，以確定疫苗接種在最短的時間內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答。另外，由于不同國家規(guī)定的免疫接種程序不同，聯(lián)合疫苗應(yīng)有接種程序的可塑性。如美國規(guī)定的HBV免疫程序比較靈活。使用DTP-HBV聯(lián)合疫苗時，出生首劑用單價HBV免疫，2、4、6月齡用DTa P-HBV四聯(lián)疫苗免疫 ^[25] 。此程序中HBV多免疫一個針次，對免疫效果沒有太大影響。在我國，目前含DTP-HBV聯(lián)合疫苗的接種程序與現(xiàn)行HBV免疫程序（0、1、6月齡）存在一定沖突，是含DTP-HBV聯(lián)合疫苗未來應(yīng)用所面臨最主要的挑戰(zhàn)，需要解決的問題包括第2劑次接種推遲對HBV免疫原性和防控效果的影響、多劑次接種的安全性以及出生劑次與后續(xù)劑次之間的交替使用等問題。另外，聯(lián)合疫苗使用中還應(yīng)注意不同生產(chǎn)廠家制造的聯(lián)合疫苗能否互相使用、抗原的重復(fù)免疫等問題。

聯(lián)合疫苗不僅為個體提供更全面、更及時的保護(hù)，而且在全球或單個國家內(nèi)都會產(chǎn)生重要的公共衛(wèi)生意義，充分顯現(xiàn)了疫苗預(yù)防疾病的高效性。盡管成功研制一種聯(lián)合疫苗面臨諸多挑戰(zhàn)，包括不同組分之間的相容性問題、抗原含量的優(yōu)化、佐劑工藝的優(yōu)化、制劑工藝的革新、理想的臨床方案和免疫程序的適應(yīng)等，但隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展，我國聯(lián)合疫苗的研發(fā)取得了很多重大突破，如13價PCV的獲批上市、IPV的成功研制、DTa P-IPV-Hib等疫苗的加速研發(fā)。我們應(yīng)該借鑒國內(nèi)外的寶貴經(jīng)驗，加大聯(lián)合疫苗前期基礎(chǔ)研究的投入，解決當(dāng)前聯(lián)合疫苗面臨的瓶頸問題，為我國新型疫苗的研發(fā)及免疫策略優(yōu)化提供更多的選擇。