如何進(jìn)行有機(jī)酸的方法優(yōu)化
關(guān)鍵詞
有機(jī)酸C18分不開
雖然液相系列才推出了兩集，但后臺已經(jīng)收到很多關(guān)于液相色譜的提問。
其中這個有機(jī)酸的方法優(yōu)化案例很有代表性，和大家一起來分析一下。
也歡迎大家給靈姐姐留言，提出你的看法。
@藍(lán)南
一直在關(guān)注色譜學(xué)堂，最近跑液相遇到了問題，跑有機(jī)酸峰挨的太近，不好分開！
七月買的zorbaxsb_aq的柱子，條件都試過，用了乙腈和pH2.0的緩沖液，效果不佳。
現(xiàn)在是甲醇加pH2.3的能分開九種酸里的六種，現(xiàn)在是抗壞血酸和乳酸分開了一點(diǎn)，但估計(jì)不能做積分處理，昨天試過1.8的，結(jié)果兩個峰之間的乳酸被蓋住了，三個峰變成兩個了。
5min-6min的三個峰分別是抗壞血酸，乳酸，莽草酸。
想請教色譜君，不想換柱子，還能有什么方法能讓抗壞血酸和乳酸完全分開？
如果一定要用C18柱分析有機(jī)酸，第一件事情是要抑制有機(jī)酸的電離。
有機(jī)酸的pKa值在3.5-4.5左右，因此緩沖鹽需要設(shè)在pH2附近。
一般C18柱的pH耐受范圍是2-8，所以這里你選了耐酸的Zorbax SB_aq的柱子，pH耐受范圍1-8，是對的。
但是仍然有三個靠前出峰的化合物不能分離，是什么原因呢？
我們來看一下這三個化合物的結(jié)構(gòu)。
首先這三個化合物能和C18固定相作用的基團(tuán)都非常少，只有一兩個甲基或亞甲基，也就是保留會很弱。
雖然實(shí)際上結(jié)構(gòu)差異很大，但主要是極性基團(tuán)，尤其是羥基的差別。
這種情況，其實(shí)非常適合用HILIC模式來分析。
使用水溶性的流動相，能夠溶解樣品。
和布滿硅羥基的硅膠柱，能夠保留樣品。
沒有一根色譜柱能分離所有的化合物。
雖然C18柱的使用非常普遍，但也不用執(zhí)著于非它不可，不然干嘛要發(fā)明那么多種柱子呢：）
忘了什么是HILIC模式？請戳這一集↓↓↓
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那么，為什么會有那么多種色譜柱呢？
過一段，我們將推送“色譜柱里，到底裝了些什么？”歡迎關(guān)注！
周末了，來點(diǎn)兒輕松的~
聊聊大閘蟹的那些事兒~
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